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          上海鹿森生物工程有限公司>>AMEKO ELISA試劑盒>>AE90713Mu小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit

          小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit

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          • 小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit

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          具體成交價以合同協(xié)議為準
          • 型號 AE90713Mu
          • 品牌 AMEKO
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 杭州市

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          更新時間:2023-11-01 14:31:49瀏覽次數(shù):400

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit
          本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中 免疫球蛋白E(IgE) 的含量。

          詳細介紹

          小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit

          小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit

          有效期:6個月

          保存條件:2-8℃

          實驗原理

          試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被  免疫球蛋白E(IgE)  捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的  免疫球蛋白E(IgE)   呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

            

          樣本處理及要求

          1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復凍融。

          2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復凍融。

          3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復凍融。

          注:標本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。


          需要而未提供的試劑和器材

          1. 酶標儀(450nm)

          2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000u

          3. 37℃恒溫箱

          4. 蒸餾水或去離子水

           

          試劑準備

          試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

          20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。 

           

          操作步驟

          1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

          2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

          3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

          4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

          5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

          6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

          7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

           

          注意事項

          1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

          2. 洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

          3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

          4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。

          5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。

          6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

          7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

          8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

          9. 不能使用過期產(chǎn)品。

          10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

           

          洗板方法

          手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。

          自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

           

          實驗結(jié)果計算

          以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。

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