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從*了解液相
HPLC的全稱(chēng)是：
高效液相色譜
High Performance Liquid Chromatography其中，Chromatography的詞根Chrom在古希臘語(yǔ)中是顏色的意思，而我們色譜學(xué)堂，ChromClass也同樣使用了Chrom這個(gè)詞根。
色譜的本意是印有標(biāo)準(zhǔn)顏色和名稱(chēng)的色表，但是一種化學(xué)分析的方法怎么會(huì)得到這樣的名字呢？這得從色譜技術(shù)的起源說(shuō)起。
100多年前，德國(guó)科學(xué)家費(fèi)德里希描述了采用濾紙來(lái)進(jìn)行定性分析，進(jìn)而在1906年，e國(guó)的植物學(xué)家茨維特利用碳酸鈣作為基質(zhì)，石油醚作為流動(dòng)相成功分離了葉綠素和胡蘿卜素。它們分離后呈現(xiàn)出不同顏色的條帶，因此茨維特把這種分離技術(shù)取名為色譜。
現(xiàn)代的色譜技術(shù)有很多種，經(jīng)常用的是氣相色譜和液相色譜。其中，氣相是通過(guò)溫度和載氣的作用將樣品變?yōu)闅鈶B(tài)，在色譜柱中運(yùn)動(dòng)起來(lái)。但有的樣品沸點(diǎn)太高，或者加熱就分解，氣相就不合適了。這時(shí)候，可以選擇用液相色譜來(lái)分析。
結(jié)構(gòu)
液相色譜一般由四個(gè)部分組成，分別是：
左右滑動(dòng)查看HPLC結(jié)構(gòu)
泵，把流動(dòng)相連續(xù)、穩(wěn)定的注入系統(tǒng)，提供穩(wěn)定的推動(dòng)力。
進(jìn)樣器，負(fù)責(zé)把液體樣品引入系統(tǒng)。
色譜柱，樣品在其上實(shí)現(xiàn)分離。
檢測(cè)器，負(fù)責(zé)檢測(cè)從色譜柱出來(lái)的樣品。
分離過(guò)程
氣相色譜的推動(dòng)力來(lái)自于載氣，而液相色譜的樣品是被流動(dòng)相溶解和推動(dòng)的。
對(duì)于氣相來(lái)說(shuō)，載氣只有氮?dú)?，氦氣，氫氣等有限的幾種。
而在液相中，流動(dòng)相可以有很多選擇，并且不同種類(lèi)，不同pH值，不同比例等等對(duì)分析的效果也會(huì)有很大影響。
樣品通過(guò)進(jìn)樣器進(jìn)樣，可以選擇手動(dòng)進(jìn)樣，或者自動(dòng)進(jìn)樣，根據(jù)方法需要，還可以使用控溫的自動(dòng)進(jìn)樣器得到更加穩(wěn)定的結(jié)果。
接著，流動(dòng)相帶動(dòng)著樣品進(jìn)入色譜柱。
色譜柱是液相分離的核心，通常來(lái)說(shuō)，越長(zhǎng)的柱子意味著越高的柱效，越短的柱子意味著越快的分離，直徑越大意味著更大的容量，直徑越小靈敏度越高。
樣品在色譜柱中分離之后，進(jìn)入檢測(cè)器，將化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)化為電信號(hào)。經(jīng)常用的是紫外、熒光這類(lèi)光學(xué)檢測(cè)器，也可以使用質(zhì)譜檢測(cè)器。
光學(xué)檢測(cè)器的好處是不破壞樣品，也就是說(shuō)，從一個(gè)檢測(cè)器出來(lái)之后樣品可以完好無(wú)損的進(jìn)入下一種檢測(cè)器，比如先接紫外檢測(cè)器，再接質(zhì)譜檢測(cè)器，就可以同時(shí)獲得光譜和質(zhì)譜的信息。
所有的信息終被色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，也就是CDS記錄和收集。CDS系統(tǒng)不僅收集數(shù)據(jù)還負(fù)責(zé)控制整個(gè)采集和分析的過(guò)程。