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C18的使用
同一廠家的色譜柱，比如ODS的，長度，內(nèi)徑，粒度大小都相同，而出峰的保留時間，和峰形不一樣，為什么呢？
ODS柱是一種常用的反相色譜柱，也叫C18柱；由于它是長鏈烷基鍵合相，有較高的碳含量和較好的疏水性，對多種類型的生物大分子有強的適應(yīng)能力，因此在生物化學(xué)分析工作中應(yīng)用廣。
即便是同一個生產(chǎn)廠家，也有很多種不同的生產(chǎn)工藝。這在色譜柱的名字上有標識，比如EclipsePlus C18或者XBridge C18等等。
不同的工藝會使得色譜柱的酸堿性、極性、殘余的硅羥基數(shù)量出現(xiàn)差別，就會有不同的選擇性。
雖然AEA、PEA、OEA這三個主峰的出峰和峰型比較接近，但兩個小雜峰的出峰位置不同。
如果同樣的色譜條件卻不能實現(xiàn)色譜分離，需要重新優(yōu)化色譜條件。
如果這是一個雜質(zhì)測定的實驗，那不同的柱子就會得到不同的測定結(jié)果。
所以，同學(xué)們?nèi)绻麚Q了不同型號的C18柱，重新確認一下新色譜柱的保留時間比較好。在使用色譜柱的過程中，也需要注意流動相的選擇。
關(guān)于流動相的選擇原則是：①樣品易溶，且溶解度盡可能大。②化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，不損壞柱子。③不妨礙檢測器檢測，紫外波長處無吸收。④粘度低，流動性好。⑤易于從其中回收樣品。⑥無毒或低毒，易于操作。⑦易于制成高純度，即色譜純。⑧廢液易處理，不污染環(huán)境
C18使用指南
1、新柱在使用前需用純有機試劑（如甲醇、乙腈）低流速沖洗，沖洗體積以×20柱體積為宜，以便固定相能得到潤濕、碳鏈舒展，使色譜柱的性能達到狀態(tài)；
2、使用時需在每日實驗結(jié)束后沖洗色譜柱，當(dāng)流動相中含有酸或鹽時，需將色譜柱中的酸或鹽沖洗干凈，通常建議用10%甲醇水沖洗×20柱體積；
3、長期保存前要將色譜柱沖洗，建議沖洗3-4小時以上，保存在純有機試劑或高 比例的有機試劑溶液（如90% 甲醇水）中；
4、日常保存溶劑（即需繼續(xù)使用）盡量與3中相同；
5、由于C18柱（極性改性處理的除外）的固定相疏水性較強，在使用過程中盡量不要使用高水相條件，若水相比例過高易引起固定相疏水塌陷，引起柱效下降，造成不可逆的負面影響，（Diamonsil 2）由于碳載量高，表現(xiàn)尤為明顯，建議使用過程中水相比例不多過90%
6、色譜柱壓力升高、柱性能下降：通常為色譜柱被污染，對色譜柱進行再生處理可恢復(fù)部分柱效；
7、色譜柱壓力驟升：通常由鹽析出或篩板堵塞引起，若是鹽析出，用10%甲醇水低流速沖洗至壓力恢復(fù)即可；若判斷并非鹽析出，以純甲醇或10%
甲醇水為流動相反沖色譜柱（將色譜柱反接，不接檢測器），若反沖半小時仍無效果則說明反沖無效，需尋找其他原因。