甲苯胺藍(lán)染色是常用的人工合成染料的一種,屬于醌亞胺染料類(lèi),這類(lèi)染料一般含有兩個(gè)發(fā)色團(tuán),一個(gè)是胺基,一個(gè)是醌型苯環(huán),來(lái)構(gòu)成色原顯色。染料除有發(fā)色團(tuán)外,還要有能使色原對(duì)組織及其他被染物產(chǎn)生親和力的原子團(tuán)即助色。助色團(tuán)能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類(lèi),幫助發(fā)色團(tuán)對(duì)組織產(chǎn)生染色力, 使切片上的組織細(xì)胞著色。甲苯胺藍(lán)不僅含有兩個(gè)發(fā)色團(tuán),還含有兩個(gè)助色團(tuán),為堿性染料,甲苯胺藍(lán)中的陽(yáng)離子有染色作用,組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽(yáng)離子相結(jié)合而被染色。
甲苯胺藍(lán)染色方法
試劑
1.甲苯胺藍(lán)液
甲苯胺藍(lán)0.5g蒸餾水定容至100mL
2.冰醋酸液
冰醋酸0.5ml蒸餾水定容至100mL
染色步驟
(一)
1.組織切片常規(guī)脫蠟至水。
2.入甲苯胺藍(lán)液30min。
3.稍水洗。
4.入冰醋酸液分化,直到胞核和顆粒清晰。
5.稍水洗,用冷風(fēng)吹干。
6.二甲苯透明,中性樹(shù)膠封固。
(二)
①切片脫臘至水。
②蒸餾水浸洗3次。
③0.1%甲苯胺藍(lán)液浸染10min。
④水洗,洗去多余染液。
⑤各級(jí)酒精脫水。
⑥二甲苯透明,中性樹(shù)膠封固。
試劑的配制
稱(chēng)取0.1g甲苯胺藍(lán),溶于100ml 0.1M醋酸鹽緩沖液中,置室溫5天后,即可使用染液于室溫下可保存3個(gè)月,若放于4℃冰箱則可保存半年左右,但該液的染色效果在早期好,若染液存放時(shí)間較長(zhǎng),則染色偏淡,應(yīng)適應(yīng)延長(zhǎng)染色時(shí)間。
注意事項(xiàng)
1、使用本試劑時(shí)建議先取 1-2 個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。樣品數(shù)量很多時(shí),可使用染色架和染色缸,以便于操作。
2、本產(chǎn)品為 1%濃度水溶液,具體使用濃度可自行稀釋。
3、由于溫度對(duì)染料的溶解度與著色力有很大的影響,若快速染色,當(dāng)室溫較低時(shí),可以適當(dāng)加溫。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
提示:本品僅用于科研實(shí)驗(yàn),不能用作醫(yī)療及臨床診斷。
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