兔肺成纖維細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

兔肺成纖維分離自肺組織；肺是機(jī)體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持肺器官的正常形態(tài)，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞傳代及凍存：

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

公司正在出售的產(chǎn)品：

生長激素結(jié)合蛋白 (P)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

半乳糖凝集素 -3(Galectin-3)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

腦神經(jīng)相關(guān)生長蛋白 -43(GAP-43)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

生長分化因子 -15(GDF-15)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)試劑盒 ，英文名： AGEs ELISA Kit

Human concanavalin A (ConA) ELISA Kit 人刀A(ConA)試劑盒

MonkeyPlateletFactor4,PF-4ELISAKit血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBLI(HumanBeta-Lactamaseinhibitors)ELISAKit人β內(nèi)酰胺酶抑制劑

細(xì)菌/ATP酶(Na+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑20次

RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/RLAⅢELISAKit兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/RLAⅢ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

G蛋白GTP-GDP解離刺激因子1抗體

環(huán)指蛋白1抗體

CTSE重組小鼠 Cathepsin E / CTSE 蛋白 Protein

ATF2 (Activating Transcription Factor2 0.5mgATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化復(fù)制因子2(多肽)

CHEK1重組人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

IL12A & IL12B Protein Human 重組人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白

FIGF Protein Rat 重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ATF2 (Activating Transcription Factor2 0.5mgATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化復(fù)制因子2(多肽)

IL12A & IL12B Protein Human 重組人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白

CTSE重組小鼠 Cathepsin E / CTSE 蛋白 Protein

FIGF Protein Rat 重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CHEK1重組人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

兔肺成纖維細(xì)胞大鼠內(nèi)皮素受體B(EB)試劑盒 ，英文名： EB ELISA Kit

Monkey ai liver cell membrane aibody (LMA) ELISA Kit 猴抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)試劑盒

RatThyroxineaibody,TAbELISAKit 大鼠甲狀腺素抗體(TAb)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGKRP(Humanglucokinaseregulatoryprotein)ELISAKit人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白

細(xì)胞脯羥化酶(prolilhydroxylase)活性比色法定量試劑盒20次

RatsolubleToll-likereceptor6,sTLR-6ELISAKit大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)試劑盒規(guī)格：96T/48T

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；

　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；

　　7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

　　1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；

　　2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；

　　3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；

　　4、長期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；

　　5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。