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產(chǎn)品概述 product description 貝博® BBproExtra® 細菌胞外多糖（extracellularpolysaccharides，EPSs）提取試劑盒主要用于提取細菌莢膜多糖以及細胞外的黏液多糖等自然或病理條件下細菌表面包被的多糖物質(zhì)。包被于菌株表面的胞外多糖對細菌的粘附以及在競爭環(huán)境中的存活和生長都具有重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)多種細菌的胞外多糖具有很強的生物學活性。本試劑盒采用簡單步驟即可快速提取細菌胞外多糖，提取產(chǎn)量高，省時，蛋白質(zhì)和核酸污染低。貝博® BBproExtra® 可以提供針對動物細胞、組織、植物、真菌、酵母、微生物、藻類、液體、土壤等各種不同樣本的蛋白提取試劑盒。

保存溫度

2-8℃

注意事項

1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完！

有效期

一年

檢測方法

WB,IP等

適用樣本

細菌

產(chǎn)品特點

1.適用性廣，能從所有細菌提取胞外多糖。
2.操作時間短，將胞外多糖提取的時間縮短至1-2小時。
3.操作簡單方便。
4.提取的多糖下游應用廣。

產(chǎn)品應用

WB,IP等

儀器準備

1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒

試劑準備

1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒

耗材準備

1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套

使用注意事項

使用注意事項：
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
? 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時間內(nèi)用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
? 下游實驗如果是進行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測，提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑，注意提取過程保持低溫操作，縮短離心時間。

使用方法

1. 室溫8000×g離心3分鐘收獲細菌細胞
2. 加入500 μl試劑A重懸細菌，8000×g離心3分鐘，棄上清。
3. 收集沉淀，加入500 μl試劑A重懸沉淀，8000×g離心3分鐘，棄上清。
4. 收集沉淀，加入500 μl提取液B重懸沉淀。
5. 在150-300 w超聲10秒間隔10秒，超聲5分鐘。
6. 在10000×g離心10分鐘取上清。
7. 在上清中加入500 μl提取液C，劇烈渦旋20秒充分混勻。
8. 在66-68℃水浴或氣浴孵育30分鐘。中間隔10分鐘用移液器輕輕吹打混勻。
9. 置4℃靜置過夜。
10. 在4℃，3000×g離心20分鐘。
11. 取最上層上清至另一干凈離心管，即得胞外多糖樣品。

參考文獻

1.W. Lin, et al.
Effects of glutaraldehyde–didecyldimethylammonium bromide combined disinfectant on the cell surface of Staphylococcus aureus
Journal of Applied Microbiology 2018

2.Quanju Xiang, et al.
Effect of common bean seed exudates on growth, lipopolysaccharide production, and lipopolysaccharide transport gene expression of Rhizobium anhuiense
Canadian Journal of Microbiology 2019

3.Bin Ma, et al.
Haemophilus parasuis infection activates NOD1/2-RIP2 signaling pathway in PK-15 cells
Developmental & Comparative Immunology 2018

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