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產(chǎn)品概述 product description 貝博® BBproExtra® 植物蛋白提取試劑盒（雙向電泳用）可以從各種植物樣本中提取總蛋白，提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高質(zhì)量的蛋白提供了保證。本試劑盒提取的蛋白用于雙向電泳。如需要用于報告基因檢測、SDS-PAGE電泳檢測、Western blotting、凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、酶活分析等下游實驗的試劑盒，請選用貝博其他貨號的試劑盒。貝博® BBproExtra® 可以提供針對動物細胞、組織、植物、真菌、酵母、微生物、藻類、液體、土壤等各種不同樣本的蛋白提取試劑盒。

保存溫度

2-8℃

注意事項

1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完！

有效期

一年

檢測方法

雙向電泳

適用樣本

植物

產(chǎn)品應(yīng)用

雙向電泳

儀器準備

1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒

試劑準備

1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒

耗材準備

1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套

使用注意事項

使用注意事項：
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
? 實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時間內(nèi)用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
?

使用方法

1. 提取液的準備：
根據(jù)所需要提取的樣本量，每500ul蛋白提取液A中加入5ul試劑B和2ul蛋白酶抑制劑混合物，充分混勻后置冰上備用。
2. 取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的100-200mg植物組織樣本用刀盡可能剪碎。
3. 加入500ul提取液，充分混勻，用勻漿機/勻漿器充分勻漿或者置于研缽中用液氮研磨。
4. 置振蕩器上振蕩20-40分鐘。
5. 在12000×g條件下將提取液離心10分鐘。
6. 將上清吸入另一干凈離心管，即可得到植物總蛋白。
7. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灮騎CA/丙酮沉淀后進行下游實驗。

常見問題分析

1.蛋白濃度低？
處理部分組織樣本時可能沒有裂解，導(dǎo)致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間即可。在持續(xù)振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。
2.用什么方法定量蛋白？
建議用BCA法。不適合用Bradford法，因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份，導(dǎo)致定量不準。如果已經(jīng)進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。

參考文獻

1.Na Zhao, Xinyue Xu, Yashitola Wamboldt, Sally A. Mackenzie, et al.
MutS HOMOLOG1 silencing mediates ORF220 substoichiometric shifting and causes male sterility in Brassica juncea
Journal of Experimental Botany 2016 67 (1): 435-444. （IF=5.677）

2.XiaokangLi, LiMu, DandanLi, et al.
Effects of the size and oxidation of graphene oxide on crop quality and specific molecular pathways
Carbon 2018 （IF=7.082）

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