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          植物蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)
          • 植物蛋白快速提取試劑盒(離心柱法)
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          更新時間:2024-08-20 21:00:06

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          產(chǎn)品概述 product description 貝博® BBproExtra® 植物蛋白提取試劑盒(離心管法)適用于從各種植物細(xì)胞、組織樣本中提取總蛋白。本試劑盒含有的配方能夠有效溶解細(xì)胞膜組份,包括細(xì)胞質(zhì)膜、核膜和各種細(xì)胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了保證。 本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、酶活性測定等下游蛋白研究實(shí)驗(yàn)。 本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白。 本試劑盒中不含有EDTA,與金屬螯和層析等下游應(yīng)用兼容。
          保存溫度
          2-8℃
          注意事項(xiàng)
          1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
          2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
          3.試劑拆封后請盡快使用完!
          有效期
          一年
          檢測方法
          離心柱
          適用樣本
          植物
          產(chǎn)品特點(diǎn)
          1、 使用方便。
          2、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
          3、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
          4、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
          產(chǎn)品應(yīng)用
          離心柱
          儀器準(zhǔn)備
          1.離心機(jī)
          2.振蕩器
          3.渦旋混勻器
          4.移液器
          5.冰箱
          6.冰盒
          試劑準(zhǔn)備
          1.PBS緩沖液
          2.蛋白定量試劑盒
          耗材準(zhǔn)備
          1.離心管
          2.吸頭
          3.一次性手套
          使用注意事項(xiàng)
          使用注意事項(xiàng):
          ? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
          ? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
          ? 實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
          ? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
          ? 如果試劑盒不能短時間內(nèi)用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
          ? 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
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          使用方法
          1. 提取液制備:
          每500 μl冷的植物蛋白提取液A中加入2 μl蛋白酶抑制劑混合物,4 μl植物蛋白提取液B,混勻后置冰上備用。
          2. 取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的100-200mg鮮嫩植物組織樣本用刀盡可能剪碎,加入500 μl提取液后用勻漿機(jī)/勻漿器充分勻漿。
          3. 在4℃條件下振蕩20-60分鐘。
          4. 將離心管內(nèi)管套上套管,將提取液吸入離心柱內(nèi)柱,在4℃,10000×g條件下離心5分鐘。
          5. 收集套管內(nèi)液體即得即可得到植物總蛋白。
          6. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。
          常見問題分析
          1.蛋白濃度低?
          處理部分樣本時可能沒有裂解,導(dǎo)致蛋白濃度低。只要適當(dāng)延長試劑A的處理時間即可。在持續(xù)振蕩的條件下處理,沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。

          2.用什么方法定量蛋白?
          建議用BCA法。不適合用Bradford法,因?yàn)樵噭〢中含有干擾Bradford法的組份,導(dǎo)致定量不準(zhǔn)。如果已經(jīng)進(jìn)行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系,則可以用Bradford法定量。

          3.提取的蛋白具有活性嗎?
          本試劑盒不含有離子型去垢劑組份,不破壞蛋白的結(jié)構(gòu),沒有對蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞,蛋白均保持其天然構(gòu)象和活性。
          參考文獻(xiàn)
          1.Na Zhao, et al.
          MutS HOMOLOG1 silencing mediates ORF220 substoichiometric shifting and causes male sterility in Brassica juncea
          Journal of Experimental Botany 2016 (IF=5.908)

          2.Juxin Yin, et al.
          Authentication of Panax ginseng from different regions
          RSC Advances 2017 (IF=3.119)

          3.XiaokangLi, LiMu, DandanLi, et al.
          Effects of the size and oxidation of graphene oxide on crop quality and specific molecular pathways
          Carbon 2018 (IF=8.821)

          4.MinZheng, et al.
          Arabidopsis GSM1 is involved in ABI4-regulated ABA signaling under high-glucose condition in early seedling growth
          Plant Science 2019 (IF=3.785)

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