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產品概述 product description 貝博SDS裂解液采用優(yōu)質原料配制，對動物細胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強裂解作用，是經典常用的細胞組織快速裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等下游實驗。貝博SDS裂解液中已含常用磷酸酶抑制劑。

保存溫度

2-8℃

注意事項

1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完！

有效期

1年

檢測方法

WB、IP等

適用樣本

細胞、組織

產品應用

WB、IP等

儀器準備

1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.勻漿機/勻漿器

試劑準備

1.PBS緩沖液（pH7.4，實驗室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液（1X））（phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：約含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
2.蛋白定量試劑盒

耗材準備

? 離心管
? 吸頭
? 一次性手套

使用注意事項

1.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
2.實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
3.蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
4.如果試劑盒不能短時間內用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
5.可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
6.下游實驗如果是進行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測，提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑，注意提取過程保持低溫操作，縮短離心時間。

使用方法

A．細胞裂解
1. 裂解液制備：每1ml冷的SDS裂解液中加入4ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取5-10×106個細胞，在4℃，1000rpm條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細胞。
3. 用冷PBS洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 每5×106個細胞中加入500ul冷的裂解液（每106個細胞加100ul SDS裂解液。大約相當于6孔板的每孔加入100ul~150ul，或一個75 cm2培養(yǎng)瓶加1~2 ml。裂解液和細胞應充分接觸。如果SDS裂解液不足量，細胞裂解效率將會降低），混勻后，在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
5. 在4℃，14000rpm條件下離心15分鐘。
6. 快速將上清吸入另一預冷的干凈離心管，用于下游實驗。

B．組織裂解
1. 裂解液制備：每1ml冷的SDS裂解液加入4ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取100mg組織樣本剪碎，加入1ml裂解液，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。
3. 將組織勻漿吸入另一預冷的干凈離心管中，在4℃，10000rpm條件下離心5分鐘。
4. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，用于下游實驗。

上述蛋白提取物可分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?br>

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