荷斯坦奶牛胎兒成纖維細胞;pCSN2-HLZ價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 荷斯坦奶牛胎兒成纖維細胞;pCSN2-HLZ價格
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-GABA /FITC 熒光素標記兔抗γ1氨基丁酸抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-NUMB/FITC 熒光素標記膜相關蛋白Numb抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Brk/PTK6 酪氨酸蛋白激酶6(激酶) 規(guī)格 0.2ml
IRS P53 (Insulin receptor substrate P53)(多肽) 0.5mg
HCF-1 英文名稱: 宿主細胞因子1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh RHCG RH血型C糖蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-NUMB/FITC 熒光素標記膜相關蛋白Numb抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
KGF 小鼠角蛋白生長因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-human Fibrinogen 可溶性纖維蛋白原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格 0.1ml
CNR-1(Human cadherln-related neuronal receptor1) ELISA Kit 人鈣粘蛋白相關的神經(jīng)受體1 96T
Sumo 2+3 英文名稱: 泛素樣蛋白Sumo2/3抗體 0.1ml
CCDC7 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白7抗體 0.2ml
Anti-human Fibrinogen 可溶性纖維蛋白原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Mink IgG/PE PE標記的兔抗水貂IgG 0.1ml
GABPB2 英文名稱: GA結合蛋白轉錄因子β/GABP-β1/GABP-β2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARH/LDL receptor adaptor protein 低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-phospho-IkB beta (Ser23)/FITC 熒光素標記磷酸化KB抑制蛋白β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Mink IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗水貂IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-Pokemon/FITC 熒光素標記兔抗蒙抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
AAV(Human adeno-associated virus) ELISA Kit 人腺相關病毒Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-IRS1(Ser789) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Leptin 瘦素抗體 規(guī)格 0.1ml
E3(Human Estriol) ELISA Kit 人雌三醇 96T
PSMD7 英文名稱: 蛋白酶調解因子7抗體 0.2ml
CLSTN2 英文名稱: 老年癡呆相關類鈣粘蛋白CS2抗體 0.2ml
Anti-phospho-IRS1(Ser789) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml