細胞名稱  家兔肌肉來源細胞培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細胞系來源于一只出生三天的雌性家兔的骨骼肌組織。由中科院昆明細胞庫于2014年建立。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1：

2傳代；3-4天一次  

傳代情況 P3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 熒光法（-）

STR -

同工酶 無

染色體

使用權(quán)限 A類
家兔肌肉來源細胞培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
Anti-Phospho-A Raf (Tyr301/302) /FITC 熒光素標記磷酸化A-Raf抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-K-ras/FITC 熒光素標記原癌基因K-ras抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CCDC16/zinc finger protein 830 鋅指蛋白830抗體 規(guī)格 0.2ml

GRP78(glucose regulated protein 78) 葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗原(熱休克蛋白70蛋白5) 0.5mg

HAP40 英文名稱： 舞蹈癥相關(guān)蛋白40/凝血因子8相關(guān)蛋白/第八因子相關(guān)蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh SMAD5 細胞信號轉(zhuǎn)導分子SMAD5抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-K-ras/FITC 熒光素標記原癌基因K-ras抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LDL-IC(Mouse LDL-IC) ELISA Kit 小鼠低密度脂蛋白免疫復合物Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CK20/FITC 熒光素標記細胞角蛋白20抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh DNA Ligase 1 DNA連接酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

mouse IgG/Biotin 生物素化小鼠IgG 0.1ml

Limd1 英文名稱： LIM結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml

玉米赤霉醇檢測試劑盒 96孔/盒 動物組織/水產(chǎn)/蜂蜜/奶

Anti-CK20/FITC 熒光素標記細胞角蛋白20抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗猴IgG 0.3ml

GPR52 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體52抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ANAPC1 細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-ISR- Alpha /FITC(Insulin Receptor- Alpha) 熒光素標記胰島素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗馬IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-Phospho-SGK1 (Thr256)/FITC 熒光素標記磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-GRO Beta/FITC 熒光素標記兔抗生長調(diào)節(jié)致癌基因β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-phospho-P53 (Ser37) /FITC 熒光素標記磷酸化抑制基因P53抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Bestrophin 4 卵黃狀黃斑病蛋白4抗體 規(guī)格 0.2ml

DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) 雙鏈RNA腺苷酸脫基酶抗原 0.5mg

GSK3 Alpha + Beta 英文名稱： 糖原合酶激酶3α+β抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Ran/ARA24 雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-phospho-P53 (Ser37) /FITC 熒光素標記磷酸化抑制基因P53抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。