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          上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>干細(xì)胞原代細(xì)胞>>小鼠雜交瘤細(xì)胞;2A1H1D1D4培養(yǎng)

          小鼠雜交瘤細(xì)胞;2A1H1D1D4培養(yǎng)

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          • 型號(hào)
          • 品牌 ATCC
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2018-05-04 17:01:49瀏覽次數(shù):754

          聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          小鼠雜交瘤細(xì)胞;2A1H1D1D4培養(yǎng)只能用于科研,不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶!

          詳細(xì)介紹

          細(xì)胞名稱  小鼠雜交瘤細(xì)胞;2A1H1D1D4培養(yǎng)
          形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

          品牌 半貼壁生長

          特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。

          培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

          傳代方法 1:

          3傳代,2-3天傳一代  

          傳代情況 C30

          凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 

          支原體檢測 陰性 

          STR

          同工酶

          染色體

          使用權(quán)限 A類

          小鼠雜交瘤細(xì)胞;2A1H1D1D4培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
          操作流程:
          1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
          1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
          1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
          1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
          1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
          1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
          1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。 
          1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
          Anti-MAG-a/b /FITC 熒光素標(biāo)記髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Anti-Tenascin C/FITC 熒光素標(biāo)記固生蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh ADAMTS4 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶4型抗體 規(guī)格 0.1ml

          Rabbit Anti-chicken IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗雞IgM 2ml

          GPR172B 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體172B抗體 0.2ml

          Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Bovine IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗IgM 規(guī)格 0.3ml

          Anti-Tenascin C/FITC 熒光素標(biāo)記固生蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          Melamine/BSA 三聚氰胺與血清白蛋白偶聯(lián)物Multi-class antibodies規(guī)格: 2mg

          Anti-CDK6 周期素依賴性激酶6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh O-GlcNAc transferase O位N-乙酰葡萄糖胺OGT抗體 規(guī)格 0.2ml

          Amicon Ultra-15離心超濾裝置 蛋白濃縮管(蛋白濃縮過濾器 蛋白濃縮過濾離心管) 個(gè)

          Tex19A 英文名稱: 表達(dá)蛋白19A抗體 0.1ml

          CHRNB2 英文名稱: 型乙酰膽堿受體B2抗體 0.2ml

          Anti-CDK6 周期素依賴性激酶6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rat IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記大鼠IgG(細(xì)胞流式同型對(duì)照) 0.1ml

          LY6G6F 英文名稱: 淋巴細(xì)胞抗原6重復(fù)位點(diǎn)蛋白G6F抗體 0.1ml

          Rhesus antibody Rh Desmin/DES 結(jié)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

          TRACP-5b(Mouse tartrate-resistant acid phosphatase 5b)ELISA Kit 小鼠抗酸性磷酸酶5bMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

          萊克多巴胺檢測試劑盒 96孔/盒 各種動(dòng)物肌肉組織、尿液、血清、飼料等

          Anti-CPSA/FITC 熒光素標(biāo)記鼠抗人復(fù)合前列腺特異性抗原單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          OT(Human oxytocin) ELISA Kit 人催產(chǎn)素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

          Anti-PKR 蛋白激酶R抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh HEATR6 癌增強(qiáng)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

          DA(Mouse dopamine) ELISA Kit 小鼠多巴胺 96T

          Pokemon 英文名稱: 蒙蛋白抗體 0.1ml

          Cytochrome P450 2A6 英文名稱: 細(xì)胞色素CPA6抗體 0.2ml

          Anti-PKR 蛋白激酶R抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。

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