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詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞；2F12培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1：
3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
雜交瘤細(xì)胞；2F12培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
Anti-MIF /FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-TPO/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABP/SHBG 雄激素結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Avidin/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗親和素 0.1ml
GCNT1 英文名稱： GCNT1葡萄糖轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Avidin/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗親和素 規(guī)格 0.1ml
Anti-TPO/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
OH-PYD(Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks) ELISA Kit 人羥基膠原吡啶交聯(lián)Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MCP-2/CCL8 單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體(人)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh kappa Opioid receptor kappa型受體抗體 規(guī)格 0.1ml
Human Lebtospira IgM ELISA Kit 人鉤端螺旋體IgM 96T
PKC theta 英文名稱： 蛋白激酶C theta抗體 0.1ml
Claudin 20 英文名稱： 緊密連接蛋白20抗體 0.1ml
Anti-MCP-2/CCL8 單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體(人)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SLC25A13 英文名稱： 線粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬酸/谷酸載體蛋白抗體 0.2ml
EPH receptor A4 英文名稱： 酪酸蛋白激酶A4抗體 0.1ml
腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 Anti-PEPT1 0.1ml
Anti-SSTR5/FITC 熒光素標(biāo)記生長(zhǎng)抑素受體5(SSTR5)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MYPT1(Thr696) 磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體 規(guī)格 0.1ml
beta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉樣肽(1-16)(大鼠，小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
IL-8 白介素8(白細(xì)胞介素-8)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CD22/BLCAM B淋巴細(xì)胞粘附分子CD22抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh pan 14-3-3 14-3-3蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
CD69 Kit Human 人 CD69 ELISA配對(duì)抗體 ELISA
Transcription factor 25 英文名稱： 核轉(zhuǎn)錄因子25抗體 0.2ml
C9orf150 英文名稱： 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框150抗體 0.2ml
Anti-CD22/BLCAM B淋巴細(xì)胞粘附分子CD22抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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