詳細介紹
小鼠雜交瘤細胞;GAPDH價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞;GAPDH價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
品牌 半貼壁生長
特征特性 細胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗,可用于基礎研究和臨床檢驗。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C10
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
anti-OCLN(Occluding)/FITC 熒光素標記人咬合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗狗IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
周期素依賴性激酶2抗體 Anti-CDK2 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG/RBITC 羅丹明標記的羊抗IgG 0.3ml
FTSJ1 英文名稱: 精神發(fā)育遲滯相關蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Plastin L 淋巴細胞胞漿蛋白LCP1抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗狗IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
PGAM2(Human phosphoglycerate mutase 2) ELISA Kit 人磷酸甘油酸變位酶2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-MYOZ/MYOZ1 MYOZ抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ILVBL 乙酰乳酸合成酶蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Human histone H2A-H2B-DNA autoantibody ELISA Kit 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體 96T
Phospho-P38 MAPK (Thr180 + Tyr182) 英文名稱: 磷酸化-原活化蛋白激酶p38抗體(P-p38 MAPK) 0.1ml
phospho-CEBPE (Thr74) 英文名稱: 磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPε抗體 0.1ml
Anti-MYOZ/MYOZ1 MYOZ抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SRGAP1 英文名稱: Rho GTP酶激活蛋白13抗體 0.2ml
FRMD2 英文名稱: FRMD2蛋白抗體 0.2ml
粘膜選址素抗體 Anti-MADCAM-1 0.2ml
Anti-TGF- Beta1/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記TGF-β1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PKC alpha/beta II (Thr638/641) 磷酸化蛋白激酶C α/β2抗體 規(guī)格 0.1ml
MOG35-55 (myelin oligo-dendrocyte glycoprotein-MOG) 髓鞘少樹突膠質(zhì)細胞糖蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
Human Eukaryotic translation initiation factor 3a,eIF3a ELISA Kit 人真核翻譯起始因子3aMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Shh/Sonic hedgehog Shh信號轉(zhuǎn)導通路膜蛋白受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GPA33 糖蛋白A33抗體 規(guī)格 0.2ml
CA(Mouse carbonic anhydrase) ELISA Kit 小鼠碳酸酐酶 96T
Orexin A 英文名稱: 增食欲素A/欲激素A抗體 0.2ml
BBS7 英文名稱: 巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白7抗體 0.2ml
Anti-Shh/Sonic hedgehog Shh信號轉(zhuǎn)導通路膜蛋白受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml