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          小鼠雜交瘤細(xì)胞;EphB3培養(yǎng)

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          • 品牌 ATCC
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2018-04-27 15:55:58瀏覽次數(shù):258

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          小鼠雜交瘤細(xì)胞;EphB3培養(yǎng)只能用于科研,不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶!

          詳細(xì)介紹

          細(xì)胞名稱  小鼠雜交瘤細(xì)胞;EphB3培養(yǎng)
          形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

          品牌 半貼壁生長

          特征特性 細(xì)胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗,可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。

          培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 

          傳代方法 1:

          3傳代,2-3天傳一代  

          傳代情況 C10

          凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 

          支原體檢測 陰性 

          STR

          同工酶 同工酶鑒定

          染色體

          使用權(quán)限 A類

          小鼠雜交瘤細(xì)胞;EphB3培養(yǎng)操作流程:
          1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
          1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
          1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
          1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
          1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
          1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
          1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。 
          1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
          貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
          懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
          Anti-Nogo R/NGR /FITC 熒光素標(biāo)記軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Anti-ZCWCC1/FITC 熒光素標(biāo)記ZCWCC1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體 Anti-Calponin 1 0.2ml

          Goat Anti-Guinea pig IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.5ml

          FSD1 英文名稱: FSD1蛋白抗體 0.2ml

          Rhesus antibody Rh Porimin 前細(xì)胞脹亡受體誘導(dǎo)膜損傷蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

          Anti-ZCWCC1/FITC 熒光素標(biāo)記ZCWCC1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          PGE2 ELISA KIT 大鼠前列腺素2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

          Anti-Phospho-EGFR(Tyr1148) 磷酸化表皮生長因子受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          Rhesus antibody Rh Myocardin 促血管平滑肌細(xì)胞分化因子抗體 規(guī)格 0.2ml

          poly-IgR(polyimmunoglobulinreceptor) ELISA Kit 人多免疫球蛋白受體 96T

          Sialoadhesin 英文名稱: 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素1抗體 0.2ml

          CK15 英文名稱: 細(xì)胞角蛋白15抗體 0.1ml

          Anti-Phospho-EGFR(Tyr1148) 磷酸化表皮生長因子受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          SRXN1 英文名稱: 硫氧還蛋白1抗體 0.2ml

          ErbB 2 英文名稱: HER2受體抗體 0.1ml

          轉(zhuǎn)移生長因子–β3抗體 Anti-TGF-β3 0.1ml

          Anti-TLR9/CD289/FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh Phospho-LATS1 (Thr1079) 磷酸化抑制基因LATS1抗體 規(guī)格 0.1ml

          BECN1(Beclin1) 一種抑癌基因(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
          PAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c) 磷脂酸磷酸酶2C(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          Anti-CD56/NCAM1 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          Rhesus antibody Rh P2RX4 三磷酸腺苷門控陽離子通道蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

          C5 Kit Human 人 Complement C5a ELISA配對抗體 ELISA

          TGF beta 1 英文名稱: 轉(zhuǎn)化生長因子β1/TGF β1/TGF-β1抗體 0.1ml

          COBLL1 英文名稱: Cordon bleu蛋白樣1抗體 0.2ml

          Anti-CD56/NCAM1 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

           

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