詳細介紹
產(chǎn)品相關參數(shù)
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
產(chǎn)品有效期:zui長6個月,儲存條件2-8℃
產(chǎn)品特異性:人顆粒蛋白酶A抗體(PPAAb)Elisa試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
產(chǎn)品實驗設備:酶標儀, 37℃恒溫箱,自動洗板機,可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭,蒸餾水,干凈的試管,容量瓶等。
產(chǎn)品應用領域:本ELISA試劑盒限科研,嚴禁臨床使用
人顆粒蛋白酶A抗體(PPAAb)Elisa試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢
1.產(chǎn)品具有高效性、靈敏性、特異性等特點
2.產(chǎn)品的穩(wěn)定性和可靠性,檢測種屬有人,動物,植物,金標ELISA試劑盒等
3.產(chǎn)品吸附均勻,吸附性能好,空白值低,孔底透明度高
4.產(chǎn)品適用于 血清、血漿、體液、尿液等各種樣本
5.產(chǎn)品質(zhì)量保證,由于產(chǎn)品本身質(zhì)量問題使實驗結(jié)果不理想,可以換貨或退貨
6. 公司與順豐快遞密切合作,保證了產(chǎn)品時效性與安全性
7.公司提供7*24小時,在實驗過程中遇到的任何問題我司高級技術(shù)人員會為你提供技術(shù)指導
產(chǎn)品圖片
聲明
1. 限于現(xiàn)有條件及科學技術(shù)水平,尚不能對所有原料進行全面的鑒定分析,本產(chǎn)品可能存
在一定的質(zhì)量技術(shù)風險。
2. zui終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環(huán)境密切相關,請
務必準備充足的待測樣品。
3. 只有全部使用試劑盒內(nèi)的試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴
格遵守本實驗說明才會得到*的檢測結(jié)果。
4. 有效期:6 個月。
【實驗準備】:
1. ELISA試劑盒及待測樣本
2. 酶標儀(450nm波長濾光片)
3. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭
4. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
5. 吸水紙
【標本要求】:
1.血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2.血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。
3.尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4.細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
5.培養(yǎng)細胞:
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6.組織標本:
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
7.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
【人顆粒蛋白酶A抗體(PPAAb)Elisa試劑盒操作步驟】:
標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,依次進行稀釋數(shù)倍。
加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
【計算結(jié)果】:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
【注意事項】:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
【洗板方法】:
1. 手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。
2. 自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
【人顆粒蛋白酶A抗體(PPAAb)Elisa試劑盒試劑盒特點體現(xiàn)】:
1、高效、靈敏、特異的抗體;
2、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
5、節(jié)省實驗經(jīng)費。
elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出標準數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關系,說明方法的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標準樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為2.98mg/L,則認為回收率為99%。
【適用范圍】:
1.適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
2.可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、雞、蝦、魚等
3.可檢測指標齊全:白介素,干擾素,血管緊張素,肺炎衣原體,趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、炎癥因子、血管生成素 等等 指標
【人顆粒蛋白酶A抗體(PPAAb)Elisa試劑盒免費代測服務】:
1.每個指標需提供100微升樣品,如做復孔則200微升
2.標本離心處理后可通知我們工作人員上門取樣(僅限本市),外省可通過泡沫箱加干冰或者冰袋寄送我司