詳細(xì)介紹
綿羊痘病毒PCR檢測試劑盒綿羊痘病毒(Sheeppox virus,SPPV)屬于痘病毒科脊椎動(dòng)物痘病毒亞科 羊痘病毒屬,可引起羊發(fā)熱、消瘦、皮膚或黏膜法之聲痘疹,嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致死亡。 羊痘被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)列為A類傳染病,我國將其列為一類動(dòng)物疾病。 因此有必要建立一種準(zhǔn)確、快速、靈敏的檢測方法對其進(jìn)行監(jiān)控。SPPV 屬 于雙股 DNA 病毒,本產(chǎn)品提供了一對特異性檢測引物,基于 PCR 方法對 SPPV 進(jìn)行快速檢測。
綿羊痘病毒PCR檢測試劑盒具有下列特點(diǎn): 1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。 2. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
規(guī)格及成分 成分 編號 50 次熱封袋包裝
即用型 PCR Mix 3.0 90805 1.5 mL
SPPV 專一性引物對 yw13541355 100 μL
SPPV 陽性對照 yw13561357 50 μL
超純水 100935 1 mL
使用手冊 1 份
運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑 樣品等
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
用自選方法純化待測樣品的 DNA。
二、陽性對照
1. 為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體菌做陽性對
照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 使用本陽性對照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。
zui在專門的區(qū)域操作。
三、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(25 uL 體系)
3. 在 PCR 管中加入下列成分:
成 份 樣品 陽性對照 陰性對照
SPPV 專一性引物對 2 uL 2 uL 2 uL
待測樣品 DNA 1-5 uL 無 無
SPPV 陽性對照 無 2 uL 無
補(bǔ)超純水到 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
即用型 PCR Mix 3.0 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
4. 輕柔混勻后上機(jī),按下面參數(shù)進(jìn)行 PCR。
過程 溫度 時(shí)間
預(yù)變性 95℃ 5 min
PCR 反應(yīng)
(35 個(gè)循環(huán))
95℃ 30 s
55℃ 30 s
72℃ 30 s
延伸 72℃ 10 min
5. 電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 177 bp。
關(guān)聯(lián)產(chǎn)品 豬痢疾短螺旋體 PCR 檢測試劑盒(CAT#:11-4100)
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