詳細(xì)介紹
豬乙型腦炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒是豬圓環(huán)病毒(porcinecircovirus PCV)的一個(gè)基因型,該病毒體積小,病毒粒子為20面體對(duì)稱結(jié)構(gòu),無(wú)囊膜,細(xì)胞培養(yǎng)不產(chǎn)生細(xì)胞病變。病毒基因組是一種環(huán)狀、單股、負(fù)鏈DNA,以滾環(huán)方式復(fù)制。研究表明,PCV2與豬的多種疾病有關(guān),是斷奶仔豬多系統(tǒng)綜合征(PMWS)的主要病原,且與母豬流產(chǎn)、先天性震顫 (CT)、育肥豬的慢性呼吸道病綜合征(PRDC)、豬皮炎和病綜合癥(PDNS)等疾病有關(guān)。PCV1無(wú)致病性,廣泛存在于豬群。目前將PCV2引發(fā)的相關(guān)疾病總稱為圓環(huán)病毒相關(guān)病(PCV2 associated diseases,PCVAD),該病對(duì)養(yǎng)豬業(yè)的影響越來(lái)越大,造成的經(jīng)濟(jì)損失越來(lái)越多。
因此有必要建立一種準(zhǔn)確、快速、靈敏的檢測(cè)方法對(duì)其進(jìn)行監(jiān)控。本產(chǎn)品即
是基于 PCR 方法對(duì)豬圓環(huán)病毒 II 型 PCV2 的快速檢測(cè)試劑盒。它具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 494 bp。
3. 豬乙型腦炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒只適用于科研,不能用于臨床診斷。
規(guī)格及成分 成分 編號(hào) 50 次熱封袋包裝
即用型 PCR Mix 3.0 90805 1.5 mL
PCV2 專一性引物對(duì) yw12851286 100 μL
PCV2 陽(yáng)性對(duì)照 yw12871288 50 μL
超純水 100935 1 mL
使用手冊(cè) 1 份
運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑 樣品等
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
用自選方法純化待測(cè)樣品的 DNA。
二、陽(yáng)性對(duì)照
1. 為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體菌做陽(yáng)性對(duì)
照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 使用本陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。
zui在專門(mén)的區(qū)域操作。
三、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(25 uL 體系)
3. 在 PCR 管中加入下列成分:
成 份 樣品 陽(yáng)性對(duì)照 陰性對(duì)照
PCV2 專一性引物對(duì) 2 uL 2 uL 2 uL
樣品 DNA 1-5 uL 無(wú) 無(wú)
PCV2 陽(yáng)性對(duì)照 無(wú) 2 uL 無(wú)
補(bǔ)超純水到 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
即用型 PCR Mix 3.0 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
4. 輕柔混勻后上機(jī),按下面參數(shù)進(jìn)行 PCR。
過(guò)程 溫度 時(shí)間
預(yù)變性 94℃ 2 min
PCR 反應(yīng)
(30 個(gè)循環(huán))
94℃ 1 min
50℃ 1 min
72℃ 1 min
延伸 72℃ 10 min
5. 電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 494 bp。
關(guān)聯(lián)產(chǎn)品 豬痢疾短螺旋體 PCR 檢測(cè)試劑盒(CAT#:11-4100)