詳細(xì)介紹
抗酒石酸酸性磷酸酶檢測試劑盒(Tartrate Resistant Acid Phosphatase Assay Kit)是一種用于快速、便捷地檢測細(xì)胞或組織樣品的裂解或勻漿產(chǎn)物的上清液、血漿、血清、尿液等樣品中內(nèi)源性的抗酒石酸酸性磷酸酯酶活性的試劑盒。
酸性磷酸酶(Acid Phosphatase),也稱酸性磷酸酯酶,在酸性條件下可以催化磷酸酯鍵的水解。酸性磷酸酶是一個蛋白家
族,哺乳動物中其分子量從18kD到100kD不等。酸性磷酸酶主要分為兩類,一類為抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase, TRAP),一類為抗氟離子酸性磷酸酶。
抗酒石酸酸性磷酸酶是一種糖基化的含金屬蛋白酶,在破骨細(xì)胞(osteoclast)和破軟骨細(xì)胞(chondroclast)中高表達(dá)。在活化的巨噬細(xì)胞和神經(jīng)元中也有表達(dá)。抗酒石酸酸性磷酸酶在細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞增殖和分化等方面起重要作用,也和活性氧產(chǎn)生和鐵離子轉(zhuǎn)運等有關(guān)??咕剖崴嵝粤姿崦缚梢员黄乒羌?xì)胞釋放到血液中,幾乎被認(rèn)為是是機體破骨活性的*血液指標(biāo)。
在一些疾病狀態(tài)下,如白血病性網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥(leukaemic reticuloendotheliosis)、戈謝病(Gaucher's disease)、艾滋病導(dǎo)致的腦病(HIV-induced encephalopathy)、破骨細(xì)胞瘤(osteoclastoma)、骨質(zhì)疏松(osteoporosis)和代謝性骨疾病
(metabolic bone disease)有關(guān)。TRAP敲除小鼠有輕微的骨骼石化癥,TRAP轉(zhuǎn)基因小鼠有輕微的骨質(zhì)疏松。
抗酒石酸酸性磷酸酶檢測試劑盒可以檢測細(xì)胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿、血清、尿液或純化的酶樣品等中的抗酒石酸酸性磷酸酶活性。
Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一種常用的磷酸酶顯色底物,在酸性條件下,可在酸性磷酸酶作用下生成para-
nitrophenol。para-nitrophenol (p-nitrophenol)在堿性條件下,呈黃色產(chǎn)物,可以在400-415nm檢測吸光度。產(chǎn)物黃色越
深, 說明酸性磷酸酶檢活性越高,反之則酶活性越低。據(jù)此通過比色分析就可以計算出酸性磷酸酶活性水平。在適量的酒石酸存在的情況下進行酸性磷酸酶的活性檢測,檢測得到的酸性磷酸酶活性就是抗酒石酸酸性磷酸酶活性。
包括標(biāo)準(zhǔn)品和空白對照,本試劑盒共可進行120個樣品的檢測。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝
P0332-1 檢測緩沖液 15ml
P0332-2 顯色底物 2管
P0332-3 酒石酸溶液 1ml
P0332-4 p-nitrophenol溶液(10mM) 0.1ml
P0332-5 反應(yīng)終止液 20ml
— 說明書 1份
保存條件:
-20℃保存,一年有效。顯色底物和p-nitrophenol溶液需避光保存。
注意事項:
如果希望進行酶活性的定量,進行酶反應(yīng)時必須注意精確計時。此時推薦采用孵育30分鐘等較長的時間,以減小操作過程中的時間誤差。同時如果樣品中酶活性較高,則可以預(yù)先適當(dāng)稀釋樣品。
樣品溶液中須避免出現(xiàn)各種酸性磷酸酶抑制劑。
一管顯色底物配制后需當(dāng)日使用完畢,因此請注意適當(dāng)多準(zhǔn)備一些樣品一起檢測,以避免試劑盒浪費。
p-nitrophenol溶液對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。反應(yīng)終止液有腐蝕性,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或腐蝕其他物品。
僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作