詳細介紹
發(fā)光法細胞活力檢測試劑盒Plus(CellTiter-Lumi™ Luminescent Cell Viability Assay Kit),簡稱CTL發(fā)光法細胞活力檢測試劑盒或CTL,是一種通過化學(xué)發(fā)光法測定細胞內(nèi)ATP含量從而用于超高靈敏度、超寬線性范圍定量檢測活細胞數(shù)目的試劑盒。
本試劑盒的性能基本達到甚至在有些方面優(yōu)于國外同類產(chǎn)品。本產(chǎn)品的用途與CellTiter-Lumi™ Plus Luminescent Cell
Viability Assay(簡稱CTL Plus)及Promega公司的CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay(簡稱CellTiter-Glo®或CTG)基本相同,檢測靈敏度和發(fā)光檢測數(shù)據(jù)略優(yōu)于CTL Plus,顯著優(yōu)于CTG,線性范圍和CTL Plus和CTG相近,但檢測上限和發(fā)光檢測數(shù)據(jù)隨時間的穩(wěn)定性稍稍低于CTL Plus和CTG。本產(chǎn)品與CTL Plus和國外同類產(chǎn)品(Competitor P)的檢測效果比較參見圖1。
發(fā)光法細胞活力檢測試劑盒Plus線性范圍寬。96孔板中,在12個至3萬個細胞范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。不同細胞的檢測數(shù)量上限會有顯著不同。如果檢測的細胞數(shù)量超過3萬,推薦使用檢測上限更高的CellTiter-Lumi™ Plus發(fā)光法細胞活力檢測試劑盒(C0068)。
本產(chǎn)品發(fā)光強度高。對于相同的細胞樣品,通常在3萬個細胞數(shù)量范圍內(nèi),本產(chǎn)品的發(fā)光效果比CTL Plus強約20-100%,比國外同類產(chǎn)品強1-3倍,實測效果會因細胞種類的不同而有所不同。例如,對于NIH3T3和HeLa細胞的檢測,CTL的發(fā)光強度比CTL Plus高約40-100%,比國外同類產(chǎn)品強約2-3倍;而對于Jurkat細胞的檢測,CTL的發(fā)光強度則比CTL Plus強約20-70%,比國外同類產(chǎn)品強約1.5-3倍(圖1D)。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高。使用本產(chǎn)品檢測細胞數(shù)量僅為25個/孔時,發(fā)光強度可達空白孔的2倍左右。本產(chǎn)品與CTL Plus和國外同類產(chǎn)品(Competitor P)的檢測效果比較參見圖1。
圖1. 本產(chǎn)品CellTiter-Lumi™ Luminescent Cell Viability Assay Kit (CTL)和同類產(chǎn)品CellTiter-Lumi™ Plus Luminescent Cell Viability Assay (CTL Plus)及國外同類產(chǎn)品(Competitor P)對不同細胞的檢測效果。圖A-C為CTL、CTL Plus和Competitor P對不同數(shù)量HeLa細胞在白色96孔板中的檢測效果,圖D為CTL、CTL Plus和Competitor P對2.5萬個/孔NIH3T3、HeLa和Jurkat細胞在白色96孔板中的檢測效果。實際讀數(shù)會因細胞種類、檢測儀器等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。
操作簡單,讀數(shù)穩(wěn)定,檢測速度快,完成檢測僅需約10分鐘。本產(chǎn)品比常見的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它細胞活力測定方法更加簡單快捷。只需把試劑盒提供的單一即用型試劑CellTiter-Lumi™發(fā)光法檢測試劑與培養(yǎng)細胞等體積混合,反應(yīng)10分鐘后即可進行化學(xué)發(fā)光檢測。無需洗滌細胞,也無需更換或去除培養(yǎng)液。并且化學(xué)發(fā)光比較穩(wěn)定,在反應(yīng)開始后的10分鐘內(nèi)下降不超過10%,30分鐘內(nèi)的下降不超過30%。
本產(chǎn)品穩(wěn)定性好。本試劑盒中的CellTiter-Lumi™發(fā)光法檢測試劑穩(wěn)定性好,反復(fù)凍融5次對檢測效果基本無影響,反復(fù)凍融10次檢測效果下降不超過10%。本產(chǎn)品4℃保存3天對檢測效果無顯著影響,4℃保存7天檢測效果下降不超過10%。室溫保存1天,仍可保留80%以上的檢測效果。37℃保存1天,可保持60%以上的檢測效果。
使用靈活便捷。本產(chǎn)品不僅適合少量樣品的檢測,也非常適合大量樣品的高通量篩選(high-throughput screening)檢測。
ATP,作為zui重要的能量分子,在細胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP是細胞新陳代謝的一個重要指標,也是具有代謝活性細胞的重要標志性分子,并和活細胞數(shù)目成良好的線性關(guān)系。因此,ATP含量能很好地反應(yīng)活細胞的數(shù)目,即本試劑盒可以通過測定ATP含量來進行細胞計數(shù)或檢測細胞活力。