公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):GSNOR抑制劑(N6022)
英文名稱(chēng):N6022
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
N6022是一種有效的,選擇性的,可逆的S-Nitrosoglutathione reductase(GSNOR)抑制劑,IC50值為8nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1208315-24-5 純度:98.62% 分子量:414.46 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
2-羥基-他英文名稱(chēng): 9-Bromo-10-phenylanthracene神經(jīng)特異蛋白酪磷N5抗體包裝25g
2-羥基阿托伐他汀 ?;?β-D-葡萄糖苷英文名稱(chēng): 2-Chloroanthracene足表達(dá)蛋白/轉(zhuǎn)錄因子21抗體包裝5g
2-羥基阿托伐他汀單鈉鹽二合物英文名稱(chēng): 9,10-Dichloroanthracene孕激受體抗體包裝100g
2-羥基阿托伐他汀內(nèi)酯英文名稱(chēng): 1,5-Dibromoanthracene神經(jīng)突觸蛋白PCLO抗體包裝25g
2-羥基雌二英文名稱(chēng): 1,8-Diiodoanthracene早老γ分泌2抗體包裝100g
2-羥基雌激英文名稱(chēng): 9-Phenylanthracene泛激1抗體包裝25g
2-羥基奈韋拉平英文名稱(chēng): N-Phenyl-9-anthramine泛激2抗體包裝500g
2-羥基炔雌英文名稱(chēng): 1-Iodonaphthalene泛激3抗體包裝25g
2-羥基英文名稱(chēng): Benz[a]anthracenep53調(diào)控PA26核蛋白抗體包裝5g
2-巰基嘌呤英文名稱(chēng): 1H-Cyclopenta[l]phenanthrene26S蛋白調(diào)節(jié)亞型S5a抗體包裝10g
2-去酰-2-基巴豆酰多烯紫杉(多烯紫杉雜質(zhì)...英文名稱(chēng): Cyclopenta[fg]tetracene-1,2-dione絲/蘇蛋白磷3B抗體包裝50g
2-去丁基-2-異戊基-5-基伊曲康唑英文名稱(chēng): Dibenz[a,h]anthracene蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移1α抗體包裝100g
2-去乙氧基-2-羥基-1氫-1-乙基坎地沙坦酯英文名稱(chēng): Dibenzo[b,def]chrysene泛連接抗體包裝25g
2-十八烯單甘油酯英文名稱(chēng): 1,2:8,9-DibenzopentacenePGBD3蛋白抗體包裝100ml
2-溴-卡比多巴英文名稱(chēng): Dibenzo[g,p]chrysene泛激4抗體包裝25ml
強(qiáng)酒海桿菌Marinobacter│vinifirmus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品谷[NMDA]受體亞基ε-2試劑盒維生D2;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū)
食戴爾福特菌Delftia│acidovorans 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品孤腓肽試劑盒維生B1(鹽硫);純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;
核盤(pán)菌Sclerotinia│sclerotiorum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品鉤端螺旋體IgM試劑盒維生K1;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū)
GSNOR抑制劑(N6022)棕櫚酰化膜蛋白7抗體山茱萸新苷I Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside
小鼠抗單克抗體珊瑚菜內(nèi)酯,珊瑚菜(標(biāo)準(zhǔn)品) Fraxin
肌球蛋白輕鏈1/3抗體珊瑚姜(標(biāo)準(zhǔn)品) Esculin
磷化肌球蛋白輕鏈抗體商陸皂苷T Esculin
肌肉特異性泛蛋白連接1抗體商陸皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Fraxetin
泛蛋白連接抗體商陸皂苷辛 6,7-Dihydroxycoumarin
單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 6,7-Dihydroxycoumarin
可溶性蘋(píng)果脫氫抗體芍藥內(nèi)酯苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Solanesol
蛋白激C亞性D型抗體蛇床子(標(biāo)準(zhǔn)品) Hesperitin