mAChR激動(dòng)劑（Bethanechol chloride）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Phospho-EGFR(Tyr1148) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-HSA/FITC 熒光素標(biāo)記鼠抗人血清白蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rh

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
沉積物鹽坑微菌磷化神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43抗體Human TSTA3(GDP-L-fucose synthase) ELISA Kit大鼠腺病(ADV)抗體(IgG)免疫試劑盒

Brenneria salicis 糖原合激-3β抗體Human TTC1 ELISA Kit大鼠?；囸I(AG)免疫試劑盒

生活飲用水  總硬度、氯化物 抗粘附多肽抗體Human TSPAN31 ELISA Kit大鼠纖維蛋白原γ鏈(Fgg)免疫試劑盒

凍膠假絲酵母腦膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制相關(guān)蛋白1抗體Human TTBK2 ELISA Kit大鼠纖維蛋白原β鏈(Fgb/Ab1-181/Ab1-216/Ac1-581)免疫試劑盒

產(chǎn)朊假絲酵母神經(jīng)膜糖蛋白M6aHuman TSPAN33 ELISA Kit大鼠纖維蛋白原α鏈(Fga)免疫試劑盒

尖鐮孢 葫蘆?；?/span>G蛋白偶聯(lián)受體101抗體Human TSPAN5 ELISA Kit大鼠纖維蛋白原(Fb)免疫試劑盒

南方鹽單胞菌胰高血糖樣肽-1受體/GLP-1受體抗體Human TST ELISA Kit大鼠纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)免疫試劑盒

灰樹花-1糖磷脂酰肌抗體Human TSPAN33 ELISA Kit大鼠纖溶原激活物抑制因子(PAI)免疫試劑盒

膠孢磷化gp130抗體Human TSPAN31 ELISA Kit大鼠纖溶原(Plg)免疫試劑盒

球孢白僵菌谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移ζ1抗體Human TSPYL4 ELISA Kit大鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)免疫試劑盒

解淀粉芽胞桿菌植物亞種甘-N-?；D(zhuǎn)移抗體Human TSPAN5 ELISA Kit大鼠纖連蛋白(FN)免疫試劑盒

淺囊狀栓菌甘-N-?；D(zhuǎn)移樣1抗體Human TSN ELISA Kit大鼠周期D3(Cyclin-D3)免疫試劑盒

平菇 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G3PP抗體Human TSNAXIP1 ELISA Kit大鼠周期D2(Cyclin-D2)免疫試劑盒

魯氏接合酵母磷化葡萄糖合成1抗體Human TSNAX ELISA Kit大鼠周期D1(Cyclin-D1)免疫試劑盒

珊瑚球菌糖原蛋白1Human TSP50 ELISA Kit大鼠因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)免疫試劑盒

皺皮菌（可訂）生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白抗體Human TSPAN1 ELISA Kit大鼠因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格：60-80目,氣相、液相色譜柱D-四氫藥根堿

大腸桿菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：80-100目,氣相、液相色譜柱原阿片堿

杜鵑尾孢菌Cercospora│rhododendri Ferraris 質(zhì)量規(guī)格：2mm-3mm,干燥劑用去芹菜糖桔梗皂苷D
mAChR激動(dòng)劑（Bethanechol chloride）白果內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： D(+)-Arabitol磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25g

白花丹（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Metol磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝5g

白花前胡（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pyridoxal hydrochloride磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25g

白花前胡（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Silicone oil磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝5g

白花前胡A英文名稱： Sodium bromide磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25g

白花前胡（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sodium hexametaphosphate磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝5g

白花前胡乙（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Albumin, from bovine pH 7.0 Fatty free磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝1g

白花蛇舌草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Diaphorase磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝5g

白樺脂(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Digitonin-water-soluble磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25g

白樺脂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DSP磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝5g

白樺脂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Glutamate Dehydrogenase磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝100g

白及（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： HOBT, 1-Hydroxybenzotriazole磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25g

白蠟樹（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： IDA, Iminodiacetic acid磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝500g

白蘞（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Lithium lactate磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝100ml

白麻苷英文名稱： Magnesium carbonate basic pentahydrate磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25ml