白介素-1β抑制劑（Diacerein）公司*的產(chǎn)品：Anti0-EDG6/SLP4 /FITC 熒光素標(biāo)記內(nèi)皮細(xì)胞的分化蛋白6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-MLK3 /FITC 熒光素標(biāo)記絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MLK3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh C3or

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：白介素-1β抑制劑（Diacerein）

英文名稱：Diacerein

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

球毛殼菌幾丁質(zhì)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human MYH10(Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle) ELISA Kit人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒

小孢根霉嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗體Human NPYR2(Neuropeptide Y Receptor Y2) ELISA Kit人乳糖凝集8(LGALS8)免疫試劑盒

人參土成對(duì)桿菌幾丁質(zhì)1抗體Human MAN1A1(Mannosidase Alpha Class 1A Member 1) ELISA Kit人乳脫氫A(LDHA)免疫試劑盒

假單胞菌屬白抗原CD97 alpha 抗體Human MMP-24(Matrix Metalloproteinase 24) ELISA Kit人乳清磷核糖轉(zhuǎn)移(OPRT)免疫試劑盒

更新世肉桿菌緊密連接蛋白2抗體Human MANF(Mesencephalic Astrocyte Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit人乳過(guò)氧化物(LPO)免疫試劑盒

淋病奈瑟菌緊密連接蛋白7抗體Human MAPK(Mitogen Activated Protein Kinase) ELISA Kit

海南油脂酵母2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框53抗體Human MMP-25(Matrix Metalloproteinase 25) ELISA Kit堿O-棕櫚?；D(zhuǎn)移1,肝亞型(CPT1A/CPT1)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框54抗體Human MMRN1(Multimerin 1) ELISA Kit堿免疫試劑盒

哈茨木霉2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框56抗體Human KERA(KeRatocan) ELISA Kit堿脂酰轉(zhuǎn)移(CACT)免疫試劑盒

熱脫氮地芽孢桿菌熱脫氮亞種2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框61抗體Human LZMg(Lysozyme G) ELISA Kit堿O -乙酰基轉(zhuǎn)移(CRAT/CAT1)免疫試劑盒

茯苓癌相關(guān)抗原抗體Human LAMA4(Laminin Alpha 4) ELISA Kit人溶血血小板活化因子(lyso-PAF)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌分裂周期相關(guān)蛋白4抗體Human LAT(Linker For Activation of T-cell) ELISA Kit人溶體相關(guān)膜蛋白2(HLAMP-2)免疫試劑盒

新疆糖絲菌色b5抗體Human LACTβ(β-Lactamase) ELISA Kit人溶菌(LZM)免疫試劑盒

球孢白僵菌鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體2抗體Human LDL(Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人絨毛膜促性腺激(HCG)免疫試劑盒

禽腺病1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框186抗體Human LCA/CD45(Leukocyte Common Antigen) ELISA Kit人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)免疫試劑盒

白布勒擔(dān)孢酵母CXC趨化因子16抗體Human LDHB(Lactate Dehydrogenase B) ELISA Kit人特異性蛋白B(PSPB)免疫試劑盒

異孢單頂孢Monacrosporium│heterosporum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRCCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ試劑盒大黃-8-O-β-D-葡萄糖苷

海洋桿菌Pontibacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRCCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α試劑盒酰

香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRcAMP和cAMP抑制cGMP 3',5'循環(huán)磷二酯10A試劑盒丁香
白介素-1β抑制劑（Diacerein）胰島單克抗體包裝5g

磷化視網(wǎng)膜母瘤相關(guān)蛋白1抗體包裝1g

磷化視網(wǎng)膜母瘤相關(guān)蛋白1抗體包裝5g

精神分裂癥相關(guān)蛋白9抗體包裝250ml

周期依賴性激抑制相關(guān)蛋白抗體包裝1g

RNA結(jié)合蛋白38抗體包裝100g

松弛肽/松弛抗體包裝500G

腎抗體包裝25g

環(huán)指蛋白20抗體包裝5g

RAN結(jié)合蛋白1抗體包裝1g

mRNA結(jié)合蛋白抗體包裝5g

環(huán)指蛋白126抗體包裝1g

小鼠抗人紅單克抗體包裝5g

視黃受體應(yīng)答蛋白2抗體包裝25g

抗Rap1A抗體包裝5g 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)