商品介紹:
CPA inhibitor是羧肽酶A(CPA)抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):223532-02-3 別名:carboxypeptidase inhibitor 純度:99.67% 分子式:C??H??NO? 分子量:313.35 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
枯草芽孢桿菌干擾alpha/beta 受體1蛋白抗體Human RNF151 ELISA Kit鳥類催乳(PRL/LTH)免疫試劑盒
犁頭霉屬干擾gamma受體1蛋白抗體Human RNF125 ELISA Kit鳥H5N1 IgG抗體ELSIA 試劑盒
枯草芽孢桿菌真核翻譯起始因子3亞基L蛋白抗體Human RNF133 ELISA Kit獼猴骨特異性堿性磷B(ALP-B)免疫試劑盒
黑曲霉干擾誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白2抗體Human RNF135 ELISA Kit家蠶卵黃蛋白(LT)免疫試劑盒
賴芽胞桿菌屬干擾誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白1B抗體Human RNF167 ELISA Kit鯽魚卵黃蛋白原(VTG)免疫試劑盒
棉盤孢160kDa內(nèi)含子結(jié)合蛋白抗體Human RNF150 ELISA Kit核黃轉(zhuǎn)運(yùn)因子3(RFT3)免疫試劑盒
蘋果黑腐皮殼Bruton酪激抑制劑蛋白抗體Human RNF168 ELISA Kit核黃轉(zhuǎn)運(yùn)因子2(RFT2)免疫試劑盒
米曲霉γ干擾誘導(dǎo)蛋白IP30抗體Human RNF212 ELISA Kit核黃轉(zhuǎn)運(yùn)因子1(RFT1)免疫試劑盒
擴(kuò)展青霉中間絲家族孤啡肽1蛋白抗體Human RNF17 ELISA Kit核苷二磷激A(NDPK-A)免疫試劑盒
金灰青霉內(nèi)臟器官發(fā)育轉(zhuǎn)位相關(guān)蛋白NPH2抗體Human KIAA1377(Uncharacterized protein KIAA1377) ELISA Kit蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原(Vtg)免疫試劑盒
裂褐層孔菌胰島受體β抗體Human RNF10 ELISA Kit大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)免疫試劑盒
茯苓內(nèi)皮凝集HL1抗體Human RND3 ELISA KitZeranol(玉米赤霉)免疫試劑盒
閃光須霉干擾α抗體Human RLBP1L2 ELISA KitTrenbolone(侖諾)免疫試劑盒
米曲霉白介-17F抗體Human RLBP1 ELISA KitSulphaquinoxaline(磺喹噁林)免疫試劑盒
谷棒桿菌白介6抗體(N端)Human RLIM ELISA KitSulphamethazine(磺二甲嘧啶)免疫試劑盒
香草蘭根疾白介6抗體Human RMI1 ELISA KitSulphadiazine(磺嘧啶)免疫試劑盒
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品膽紅
埃及枝頂孢Acremonium│egyptiacum 質(zhì)量規(guī)格:>75.0%(GC)根皮
直德氏霉Drechslera│directa 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)蟾靈
CPA抑制劑(CPA inhibitor)CBP/CREBBP CREB結(jié)合蛋白抗體草 ≥99.9999% (metals basis)
HP1 gamma 異染色質(zhì)蛋白1-γ抗體四十八烷 Standard for GC,≥99.0% (GC)
Phospho-HP1 gamma (Ser83) 化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體α-氧代-2-呋喃 97%
CBX5 CBX5抗體奧美拉唑
Cbx8 染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8抗體對(duì)羥聯(lián)苯 用于環(huán)境分析
CCK8 膽囊收縮抗體棕櫚棕櫚酯 98%
CC16 克拉拉蛋白抗體棕櫚棕櫚酯 95%
CCP 瓜氨環(huán)肽抗體藍(lán)五號(hào)鈉鹽 80%