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          ES-2 (卵巢透明細胞癌細胞)

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          • ES-2 (卵巢透明細胞癌細胞)

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-02 16:28:41瀏覽次數(shù):303

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          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X0079 應用領域 化工
          主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
          ES-2 (卵巢透明細胞癌細胞) 的相關*:32451-88-0異綠原C 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
          布美他 規(guī)格: 100mg
          115841-09-3丹C; Salvialicaci 規(guī)格: 20mg
          3570-40-9白綿馬AA 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
          磺鈉 規(guī)格: 5g
          628-97-7棕櫚乙酯 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
          191729-45-0通

          詳細介紹

          產(chǎn)品屬性: 

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          ES-2 (卵巢透明細胞癌細胞)

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0079

          商品介紹:

          名稱    ES-2 (卵巢透明細胞癌細胞)  

          別稱ES2

          種屬人類

          年齡(性別)女性,47

          組織來源透明細胞癌,卵巢

          生長特性貼壁細胞

          細胞形態(tài)上皮細胞樣

          背景描述ES-2細胞是建自45歲女性黑人的外科腫瘤標本,該腫瘤為低分化卵巢透明細胞癌。ES-2細胞最初生長在軟瓊脂中;ES-2細胞在裸鼠中成瘤。ES-2細胞對多種藥物包括阿霉素、順鉑、卡氯芥、*泊甙等表現(xiàn)出低到中等的耐受性;ES-2細胞表達低水平的P糖蛋白。

          生物安全等級1

          生長培養(yǎng)基McCoy’s 5A10% FBS1% P/S

          推薦傳代比例1:3-1:4

          推薦換液頻率2~3/

          倍增時間~28-36小時

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%;CO2,5%

          溫度:37℃

          致瘤性Yes, tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.

          基因表達情況P glycoprotein

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒進口、分裝

          S100鈣結(jié)合蛋白P(S100P)免疫試劑盒進口、組裝

          抗磷脂酰絲抗體(APSA)免疫試劑盒進口、組裝

          Q熱科克斯體2(Q fever)抗體(IgM)免疫試劑盒進口、分裝

          B2(VB2)免疫試劑盒進口、組裝

          乙醛脫氫(ALDH)免疫試劑盒進口、分裝

          山羊超氧化物歧化1,可溶性(SOD1)免疫試劑盒進口、組裝

          小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)免疫試劑盒*直銷

          小鼠醛固酮(ALD)免疫試劑盒進口、組裝

          兔子6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)免疫試劑盒進口、組裝

          ES-2 (卵巢透明細胞癌細胞) 3%NaCl雙水解  20支

          2 ug pLVX-ZsGreen1-N1 pLVX-ZsGreen1-N1 低溫運輸,-20℃保存

          柯氏尿素瓊脂  250g

          3000U 谷脫氫 GLDH   -20℃保存

          50T 壞死梭桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

          300µL 山羊抗兔IgG(H+L),辣根過氧化物標記 Goat Anti-Rabbit IgG(H+L),HRP Conjugate -20℃保存

          250mL Alsever’s Solution  Alsever’s Solution  常溫保存

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