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產(chǎn)品名稱:抗壞血酸(AsA)含量測(cè)試盒規(guī)格
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測(cè)試方法:微量法、可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào):YS-01S6354
測(cè)定意義
AsA又稱維生C。AsA是輔酶、自由基清除劑、電子共體/受體和草酸鹽與酒石酸鹽生物合成的底物等。作為植物細(xì)胞中最重要的抗氧化劑,AsA在保護(hù)葉綠體免于氧化損傷起著舉足輕重的作用,也是衡量農(nóng)作物產(chǎn)品品質(zhì)的重要指標(biāo)之一。
測(cè)定原理:
抗壞血酸氧化酶(AAO)催化AsA氧化生成DHA,通過(guò)測(cè)定AsA的氧化速率,即可計(jì)算出AsA含量。
自備儀器和用品:
研缽、冰、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器和蒸餾水。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記壞死因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PLGF (Placenta growth factor) 小鼠胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體β抗體 Anti-TmR2 0.2ml
5HT1F Receptor 英文名稱: 5-羥色胺受體1F抗體 0.2ml
phospho-ERK1 (Thr197 +Thr202) 英文名稱: 磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-JunB(Ser259) 磷酸化活化蛋白激酶B抗體 規(guī)格 0.1ml
PLGF (Placenta growth factor) 小鼠胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
RKIP(Raf kinase inhibitor protein) Raf激酶抑制蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Aurora C 有絲分裂激酶B抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Akt(Thr450) 磷酸化蛋白激酶B抗體 規(guī)格 0.1ml
Melanoma 黑色素瘤 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
UNC5B 英文名稱: 神經(jīng)突起誘導(dǎo)因子受體UNC5B抗體 0.1ml
CATSPER4 英文名稱: 陽(yáng)離子通道相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml
Anti-Aurora C 有絲分裂激酶B抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SnoN 英文名稱: Smad核轉(zhuǎn)錄共抑制因子抗體 0.2ml
E2F2 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體 0.1ml
抗干燥癥SSB/La抗體 Anti-SSB/La 0.2ml
Anti-TIEG1/KLF10/FITC 熒光素標(biāo)記TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Ser400) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶8抗體 規(guī)格 0.1ml
AVPR2(arginine vasopressin receptor 2) 精氨酸加壓素受體2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
抗壞血酸(AsA)含量測(cè)試盒規(guī)格芹菜素(標(biāo)準(zhǔn)品)山楂葉(山里紅) 石蠟切片組織線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
齊墩果酸黃精(黃精) 線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒
齊墩果酸(高純98%)竹葉柴胡 線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
齊墩果酸(標(biāo)準(zhǔn)品)綠萍 線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
莽草酸艾葉線粒體復(fù)合物V蛋白共沉淀分析試劑盒
莽草酸(標(biāo)準(zhǔn)品)鴨膽子線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒
羊藿苷杏葉防風(fēng) 鈣ATP酶PMCA蛋白表達(dá)流式儀檢測(cè)試劑盒
羊藿苷(標(biāo)準(zhǔn)品)五靈脂載玻片鈣ATP酶PMCA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。