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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱：NADP蘋果酸酶（NADP-ME）測試盒說明書
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測試方法:微量法、紫外分光光度法
貨號：YS-01S6339
測定意義
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動物和植物胞漿中，尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng)，產(chǎn)生丙酮酸和CO2，以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng)，是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物ME活性測定較多，已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點。根據(jù)輔酶專一性和對底物特異性的不同，可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
測定原理：
NADP-ME催化NADP+還原成NADPH，在340nm下測定NADPH增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細(xì)閱讀購買說明！
樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達2.000ml。
2）. 過濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 。
4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
操作步驟:
實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
特點:
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
Anti-PDGF-BB/FITC 熒光素標(biāo)記血小板源性生長因子-BB抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti- guinea pig IgM/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗豚鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
死亡受體4抗體 Anti-DR4/APO2/TRAILR1 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml
FBXO7 英文名稱： F-box蛋白家族FBXO7抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151) 磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti- guinea pig IgM/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗豚鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
SIP1 peptide 運動神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-Bim 細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PGGT1A/FNTA 蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移酶1α抗體 規(guī)格 0.2ml
Flt-1/VEGFR1 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Urocortin 3 英文名稱： 尿皮質(zhì)素UCN3抗體 0.1ml
CCL24 英文名稱： 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白24抗體 0.2ml
Anti-Bim 細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
phospho-SYN1(Ser549) 英文名稱： 磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml
Ephrin B 英文名稱： Ephrin B抗體 0.1ml
轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體 anti-TCF7L2 0.2ml
Anti-Phospho-TLK1 (Ser695)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-LKB1(Ser334) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
NT-3 神經(jīng)生長因子-3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
NADP蘋果酸酶（NADP-ME）測試盒說明書安石榴甙（標(biāo)準(zhǔn)品）牛大力（美麗崖豆藤） 石蠟切片組織PP2A蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
鹽酸羅格列酮皂角 PP2A蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
γ-氨基丁酸(GABA) 鹿銜草 PP2A蛋白表達熒光定量檢測試劑盒
γ-氨基丁酸(GABA),標(biāo)準(zhǔn)品番石榴葉 PP2A蛋白表達西方雜交分析試劑盒
澳洲茄邊堿（標(biāo)準(zhǔn)品）矮地茶PP2A蛋白共沉淀分析試劑盒
澳洲茄堿（標(biāo)準(zhǔn)品）槐角PP2A蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
安格洛苷 C（標(biāo)準(zhǔn)品）藤黃 IKB-ALPHA蛋白表達流式儀檢測試劑盒
托瑞米芬八角麻載玻片IKB-ALPHA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
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