詳細(xì)介紹
產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:腦膜炎奈瑟菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Neisseria meningitidis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
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實驗過程:
一、腦膜炎奈瑟菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
Paeoniflorin孕激素/孕檢測試劑盒20mg
趨化因子C-C-基元受體3(CCR3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 3 (CCR3)
趨化因子C-C-基元受體6(CCR6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 LRG1 蛋白 (His 標(biāo)簽)*3支/套×5(g)
BK(Human Bradykinin) ELISA Kit 人血管舒緩激肽CAS號:872 (Me... NADP蘋果酶檢測試盒100gHuman/人Elisa試盒3061914
Narirutin孕激素誘導(dǎo)阻斷因子檢測試劑盒20mg
TAE684 質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的ALK抑制劑 NVP-TAE684
高分子量激肽原(HMWK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 LRG1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)*5mL×2/套×5(g)
MLC(Human Myosin light Chain) ELISA Kit 人肌球蛋白輕鏈CAS號:8115 碳酐酶β檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒30652110
白果苦內(nèi)J化學(xué)試劑 I 5mg
紫杉醇 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 5小鼠次級淋巴組織趨化因子6Ckine(CCL21)ELISA試劑盒,英文名:CCL21 ELISA Kit
Liver extract powder(Beef)BR透明質(zhì)合酶3檢測試盒100mgB細(xì)胞淋瘤子2檢測試盒CD147
Cy7N羥基琥珀酰亞5mg
槲皮素 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢 ELISA Kit for Human Adenosine deaminase-like protein小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒,英文名:GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61 ELISA Kit
Brain infusion powderBR沙眼衣原體抗原檢測試盒20mgCD147分子檢測試盒Clusterofdifferentiation30
竹節(jié)參苷VCy7 5mg
4'-羥基氟比洛芬 質(zhì)量規(guī)格:國進(jìn)口 4'-Hydroxy Flurbiprofen 成人真成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
HAT Media Supplement (50×) HybriMax™γ射線滅菌ER脂筏相關(guān)蛋白2檢測試盒20mgCD30分子檢測試盒Clusterofdifferentiation34
腦膜炎奈瑟菌探針法熒光定量PCR試劑盒人參皂苷 Rg5 CAS號: 74964140/186763780 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
人參皂苷 Rg4 CAS號: 126223287 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
去表雄; 脫表雄甾 CAS號: 53430 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
羥酪醋 CAS號: 69039027 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
檸檬E CAS號: 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
檸檬C CAS號: 174972806 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
檸檬B CAS號: 174972793 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
牡荊素精銨鹽 CAS號: 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
羅漢果皂苷Ive CAS號: 88915644 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
蘆薈大黃素8O葡萄糖苷 CAS號: 33037466 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢
欖香 CAS號: 28282259 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
苦參新 F CAS號: 34981243 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
桔梗皂苷D2 CAS號: 66663909 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
氧醉椒素 CAS號: 500629 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
黃楊堿 CAS號: 4236731 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢