詳細(xì)介紹
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:腦膜炎奈瑟菌群探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Neisseria meningitidis Group
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、腦膜炎奈瑟菌群探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
98%1g250mg24去酰澤瀉醇O77736matrix metalloproteinase 26
核糖核酶A10(RNASE10)重組蛋白英文名稱:Recombinant Ribonuclease A10 (RNASE10)
二氫嘧啶脫氫酶(DPYD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 SCG2 / Secretogranin II 蛋白 (His 標(biāo)簽)*4支/套×5(g)
人PeiotrophinphosphoCMyc(Thr373) 化致癌基CMyc抗體規(guī)格:96T/48TAmiodarone Hydrochloride規(guī)格:100mgDLEC1檢測試盒10mg人橫紋肌肉瘤細(xì)胞,A204細(xì)胞1x10^6cells
Rhamnose鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白檢測試劑盒20mg
白屈菜紅堿(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Chelerythrine
D組著色性干皮病偶聯(lián)因子(XPD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 BTN3A3 蛋白 (His 標(biāo)簽)*4支/套×5(g)
bFABP(Human brain fatty acid binding protein) ELISA Kit 人腦型脂肪結(jié)合蛋白CAS號:928810 NAD蘋果酶檢測試盒500uHuman/人Elisa試盒3061903
98%100g25g天門冬氨氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)檢測試劑盒(單試劑法)phospholipase A2 Receptor 1 antibody
扎(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:UV法溶出度檢查 Chlormezanone Super-Bradford蛋白定量試劑盒豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum
Have the biological activity Peptide products 有生物學(xué)活性的多肽產(chǎn)品進(jìn)口、分裝βN酰氨基葡萄糖苷酶檢測試盒100mgHuman/人Elisa試盒487683
梔子3'DABCYL CPG *500 Å*5mg
1-十二基磺鈉[離子對色譜級] 質(zhì)量規(guī)格:離子對色譜用試劑 IPC-ALKS-12 李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基 規(guī)格: 1000ml/瓶 用途: 用于分離和初步鑒別單增李斯特氏菌和其它李斯特菌
BetaAmyloid(116) β淀粉樣肽116(多肽蛋白)進(jìn)口、原裝細(xì)胞色素還原酶檢測試盒25mgHuman/人Elisa試盒488108
化學(xué)試劑 II 5mg
茴香腦 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg L選擇素抗體 TFR2 ELISA Kit 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)ELISA試劑盒
全胃浸粉BR透明質(zhì)合酶1檢測試盒5mgBcl2相關(guān)X蛋白檢測試盒Bcellleukemia;lymphoma2
腦膜炎奈瑟菌群探針法熒光定量PCR試劑盒異去羊藿素 CAS號: 28610302 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
異黃腐 CAS號: 70872296 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
鹽辛可寧 CAS號: 1479173 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
香草 CAS號: 498022 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
細(xì)葉遠(yuǎn)志苷A CAS號: 139726355 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
細(xì)心醛 CAS號: 14374620 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
脫氧脫酰土荊皮 CAS號: 500736174 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
惕格 CAS號: 80591 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
蘇鐵雙黃 CAS號: 2608211 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
山梔苷 CAS號: 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg訂購|咨
3O桑布雙糖苷 CAS號: 27661514 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
山茶甙B CAS號: 131573905 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
山茶甙A CAS號: 135095522 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
三葉豆苷 CAS號: 23627874 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
三七皂苷FC CAS號: 88122525 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢