產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Glycyl tRNA Synthetase (GARS) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2023-03-21 21:21:50瀏覽次數(shù):219
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Glycyl tRNA Synthetase (GARS) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
甘氨酰tRNA合成酶(GARS)重組蛋白 | Recombinant Glycyl tRNA Synthetase (GARS) | Homo sapiens (Human,人) |
商品介紹:
CMT2D; CMT2-D; DSMAV; GlyRS; SMAD1; EJ; Charcot-Marie-Tooth Neuropathy 2D; Glycine tRNA Ligase; Diadenosine tetraphosphate synthetase; AP-4-A synthetase 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位::線粒體, 細(xì)胞質(zhì) 預(yù)測(cè)分子量:22.7kDa 實(shí)際分子量:23kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Val567~Glu735 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點(diǎn):5.1 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
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操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng):
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí)。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
CD11a產(chǎn)品名稱: 整合suαL抗體產(chǎn)品別名: Integrin αL; Integrin-αL; Integrin-α-L; Integrin α L;
Klotho產(chǎn)品名稱: Klotho多肽蛋白抗體產(chǎn)品別名: 克老su
BPTF產(chǎn)品名稱: 胎兒阿茲海默抗原/核小體重塑因子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Rabbit, Sheep, GuineaPig
FUBP3產(chǎn)品名稱: FUBP3單克隆抗體交叉反應(yīng): Human
ADAM2產(chǎn)品名稱: 去整合su樣金屬蛋白mei2抗體交叉反應(yīng): Human
MAPKAP1/SIN1產(chǎn)品名稱: 絲裂原活化蛋白激mei相關(guān)蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
BTN2A1產(chǎn)品名稱: 嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體交叉反應(yīng): Human
RAD51AP2產(chǎn)品名稱: RAD51AP2蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Dog, Horse, Rabbit
GALNT12產(chǎn)品名稱: 多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移mei12抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse, Rabbit
ADCY3產(chǎn)品名稱: 苷suan環(huán)化mei3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
甘氨酰tRNA合成酶(GARS)重組蛋白人15-epi-氧脂su A4(15-epi-LXA4)ELISA試劑盒15-epi-LXA415-epi-氧脂su A4ELISA試劑盒Human 15-epi-Lipoxin A4,15-epi-LXA4 ELISA Kit
人14-3-3蛋白(14-3-3 pro)ELISA試劑盒14-3-3 pro14-3-3蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human 14-3-3 Protein ELISA Kit
人14-3-3 蛋白 beta/alpha(YWHAB)ELISA試劑盒YWHAB14-3-3 蛋白 beta/alphaelisa檢測(cè)試劑盒Human YWHAB ELISA kit
人12-脂氧化mei/脂加氧mei(LOX-12)ELISA試劑盒LOX-1212-脂氧化mei/脂加氧meielisa kitHuman 12-lipoxygenase,LOX-12 ELISA Kit
人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)ELISA試劑盒1,5-AG1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human 1,5-anhydroglucitol,1,5-AG ELISA Kit