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產(chǎn)品名稱:濾紙酶測(cè)試盒品牌
規(guī)格 : 50管/24樣、100管/48樣
測(cè)試方法:微量法、可見分光光度法
貨號(hào):YS-01S6545
測(cè)定意義
纖維素酶是由微生物產(chǎn)生的多組分的酶系,能水解纖維素β-1,4葡萄糖苷鍵生成葡萄糖,濾紙酶是其中的一個(gè)組分,研究濾紙酶活力對(duì)纖維素酶的研究具有非常重要的意義。
測(cè)定原理
濾紙酶水解濾紙產(chǎn)生的還原糖能與3,5-二硝基水楊酸生成紅棕色氨基化合物,在540nm處有最大光吸收,在一定范圍內(nèi)反應(yīng)液顏色深淺與還原糖的量成正比,可測(cè)定計(jì)算得濾紙酶的活力。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
Anti-PCNA/FITC 熒光素標(biāo)記增殖細(xì)胞核抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-rat IgM/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗大鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
DISC1 N端抗體 Anti-DISC1 0.2ml
Mouse Anti-human IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1ml
FBXL5 英文名稱: FBXL5蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-TRIM25(The91) 磷酸化雌反應(yīng)指狀蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-rat IgM/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗大鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
Skp2 peptide 細(xì)胞S相激酶相關(guān)蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-phospho-Bim(Ser55) 磷酸化細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PGE2 前列腺素E2抗體 規(guī)格 0.1ml
FAK 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
TXNDC4 英文名稱: 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白44抗體 0.1ml
C2orf18 英文名稱: 2號(hào)染色體開放閱讀框18抗體 0.2ml
Anti-phospho-Bim(Ser55) 磷酸化細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Smad2(Ser465 + Ser467) 英文名稱: 磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體 0.1ml
phospho-eIF4EBP1 (Thr36) 英文名稱: 磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
蛋白激酶N2抗體 anti-PKN2 0.1ml
Anti-Phospho-Syk (Tyr323) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化非受體型酪氨酸蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MLK3(Thr277/Ser281) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MLK3抗體 規(guī)格 0.1ml
H5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2) H5N1流感病毒M2型(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
濾紙酶測(cè)試盒品牌釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:水)甲硫威 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):2032-65-7 100mg凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)格莫瑞(Gomori)染色試劑盒
釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,基體:1%HCI)滅多威,硫雙威 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):59669-26-0 250mg石蠟切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)改良格莫瑞三色(MGT) 染色試劑盒
鐿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)烯蟲酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):40596-69-8 100mg凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)改良格莫瑞三色(MGT)染色試劑盒
鐿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml in 10%HCl)甲氧滴滴涕 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):72-43-5 100mg石蠟切片彈性纖維(ELASTIC)米勒(MIILER)染色試劑盒
鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000mg/L,溶劑:1%鹽酸)甲氧蟲酰肼 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):161050-58-4 100mg凍切片彈性纖維(ELASTIC)米勒(MIILER)染色試劑盒
鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:1%鹽酸)硫酸甲酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):556-61-6 250mg石蠟切片彈性纖維(ELASTIC)偉郝夫范吉森(Verhoeff-Van Gieson)染色試劑盒
二溴一氯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/ml,基體:甲)甲基氫化潑尼松標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào): 83-43-2 100mg凍切片彈性纖維(ELASTIC)偉郝夫范吉森(Verhoeff-Van Gieson)染色試劑盒
2,3-二甲酚標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)甲氧氯普 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):7232-21-5 10g石蠟切片彈性纖維(ELASTIC)馬森(MASSON)染色試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。