產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D2399 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Ribonuclease H2 Subunit A (RNASEH2A) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
上海谷研實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15026555973 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-20 10:37:10瀏覽次數(shù):144
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D2399 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Ribonuclease H2 Subunit A (RNASEH2A) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
核糖核酸酶H2亞基A(RNASEH2A)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2399 |
英文名稱:Recombinant Ribonuclease H2 Subunit A (RNASEH2A)
Rnase-H2A; RNASEHI; RNHIA; RNHL; AGS4; Ribonuclease H2,Large Subunit; Aicardi-Goutieres Syndrome 4; Ribonuclease HI large subunit
型號:GOY-01D2399
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::細胞核
預(yù)測分子量:37.1kDa
實際分子量:37kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Met1~Leu299 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:5.1
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽(Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
解整合素金屬12(ADAM12)真核蛋白英文名稱:Eukaryotic A Disintegrin And Metalloprotease 12 (ADAM12)MCMP; MCMPMltna; MLTN; MLTNA; Meltrin Alpha; Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 12物種:Human,人
前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素5(PCSK5)重組蛋白英文名稱:Recombinant Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 5 (PCSK5)PC5; PC6; PC6A; SPC6; Subtilisin/kexin-like protease PC5; Proprotein convertase 5物種:Human,人
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氨肽酶2(ERAP2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Endoplasmic Reticulum Aminopeptidase 2 (ERAP2)L-RAP; LRAP; Leukocyte-Derived Arginine Aminopeptidase物種:Human,人
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus香菇 Lentinula edodes
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2 ug pGAS-TA-Luc pGAS-TA-Luc 低溫運輸,-20℃保存
1 管 MDS 42recA trfA大腸桿菌
2 ug pSIH1-H1-CopGFP pSIH1-H1-CopGFP 低溫運輸,-20℃保存
50T 梅毒螺旋體PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
豬高爾基蛋白73(GP-73)免疫試劑盒進口、分裝
2 ug pTAL-Luc pTAL-Luc 低溫運輸,-20℃保存
1套 CN/DAB 底物套裝 CN/DAB -20℃避光保存
大鼠基質(zhì)金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒進口、組裝
志賀氏菌顯色培養(yǎng)基 1000ml
12塊 SDS-PAGE預(yù)制膠 Instant SDS-PAGE Gel 4℃保存