蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Valyl tRNA Synthetase (VARS)

G7A; VARS2; ValRS; Valine tRNA Ligase 1,Cytoplasmic; Protein G7a

型號：GOY-01D2388

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測分子量：26.9kDa

實(shí)際分子量：27kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ser2~Gln219 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：8.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

多聚ADP核糖甘油水解酶(PARG)重組蛋白英文名稱：Recombinant Poly ADP Ribose Glycohydrolase (PARG)酶與激酶物種：Human，人

蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(ERp57)重組蛋白英文名稱：Recombinant Endoplasmic Reticulum Resident Protein 57 (ERp57)P58; ERp61; PDIA3; ERp60; GRP57; PI-PLC; GRP58; Glucose Regulated Protein,58kDa; Protein Disulfide Isomerase-Associated 3; Endoplasmic reticulum resident protein 57物種：Human，人

通道激活1(CAP1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Channel Activating Protease 1 (CAP1)PRSS8; Prostasin; Protease, Serine 8物種：Mouse，小鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

植物桿菌 Lactobacillus plantarum大鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)基

8-O-乙酰山梔苷甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 8-O-Acetyl shanzhiside methyl ester

 多脂鱗傘 Pholiota adiposa土曲霉 Aspergillus terreus

乙酰紫堇靈（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Acetylcorynoline

 SGC-7901, 人胃腺細(xì)胞系Lec1(倉鼠卵巢細(xì)胞)

異補(bǔ)骨脂查爾;補(bǔ)骨脂乙素 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Isobavachalcone

 人心室肌細(xì)胞培養(yǎng)基淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus

異阿魏（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 3-Hydroxy-4-methoxycinnamic acid

 地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus

異補(bǔ)骨脂二氫黃（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Isobavachin

 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum光帽鱗傘 Pholiota nameko

異補(bǔ)骨脂素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Angelicin

 CHL(倉鼠肺細(xì)胞)小鼠表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基

異佛手柑內(nèi)酯 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Isobergapten

 柱黃曲霉 Aspergillus flavus var. column成人表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基

異甘草苷（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Isoliquiritin

纈氨酰tRNA合成酶(VARS)重組蛋白人豬血紅蛋白(Hb)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

100mL PEG 3350 Solution,50%   PEG 3350 Solution,50%   常溫保存

人Rho家族GTP1(RND1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

25g N-2-  -N’-2- 乙基磺酸鈉 HEPES，Sodium Salt 室溫保存

500mL Phosphate Buffer，0.2M, pH7.4   Phosphate Buffer，0.2M, pH7.4   常溫保存

人SPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合蛋白2(SMOC2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

500U 堿性，牛小腸 Alkaline Phosphatase，Calf Intestinal -20℃保存

2 ug pCL-Ampho pCL-Ampho 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

豬肌U型酸激,線粒體(CKMT1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人精脫羧(ADC)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

10g  Indole  室溫保存