詳細(xì)介紹
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱 | 防已染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Radix stephaniae tetrandrae |
規(guī)格 | 50次 |
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:2-3周
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。
以下是公司*的產(chǎn)品:
人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人抗肌動(dòng)蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人錨蛋白B(Ank-B)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管緊張素Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管緊張肽酶A(ATA)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型(AgtrⅠa)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
防已染料法PCR鑒定試劑盒人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
人血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。