詳細介紹
小鼠雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法 英文名稱:Mouse Estradiol receptor,ER ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質量問題,收貨后十五個工作日內包退換。
英文名稱:Mouse Estradiol receptor,ER ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應。
5. 建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結果時乘以相應的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商, 如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調換,但概不承擔產品本身以外的任何損失。
小鼠雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
小鼠腎小球內皮細胞*培養(yǎng)基100mL
A7r5(大鼠胸大動脈平滑肌細胞)5×106cells/瓶×2
WM35, 人黑色素瘤細胞
粘質沙雷氏菌 Serratia marcescens
3T3-L1(小鼠胚胎成纖維細胞)5×106cells/瓶×2
鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
人滑膜細胞*培養(yǎng)基100mL
費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
大鼠骨骼肌細胞*培養(yǎng)基100mL
大豆慢生根瘤菌
人卵巢成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
香菇 Lentinula edodes
香菇 Lentinula edodes
SDS-PAGE Loading Buffer (還原,5x)10ml國產
Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)規(guī)格:10000次
rEPC,大鼠內皮祖細胞-骨髓
大鼠前列腺上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
雅致放射毛霉 Actinomucor elegans
C2C12(小鼠成肌細胞)5×106cells/瓶×2
漆斑菌 Myrothecium sp.
人臍動脈內皮細胞 Human
H9c2大鼠心肌細胞(ATCC來源)Pimelic Diphenylamide 106 (10 mg)N1-(2-aminophenyl)-N7-(4-methylphenyl)-heptanediamide; TC-H 106|Histone Deacetylase Inhibitor VII; Pimelic Diphenylamide 106
Cannabidiol dimethyl ether (1 mg)1,3-dimethoxy-2-[(1R,6R)-3-methyl-6-(1-methylethenyl)-2-cyclohexen-1-yl]-5-pentyl-benzene; Cannabidiol-2’,6’-dimethyl ether|CBDD; Cannabidiol dimethyl ether
ST638 (5 mg)2-cyano-3-[3-ethoxy-4-hydroxy-5-[(5-phenylthio)methyl]phenyl]-2-propenamide; ST638
Oxalomalic Acid (sodium salt) (1 mg)3-carboxy-3-deoxy-2-pentulosaric acid, trisodium salt; Oxalomalic Acid (sodium salt)
Salidroside (5 mg)2-(4-hydroxyphenyl)ethyl-β-D-glucopyranoside; Rhodioloside; Salidroside
Butaprost (5 mg)9-oxo-11。alpha。,16S-dihydroxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid, methyl ester; 15-deoxy-16S-hydroxy-17-cyclobutyl PGE1 methyl ester|TR 4979; Butaprost
JWH 116 (5 mg)(2-ethyl-1-pentyl-1H-indol-3-yl)-1-naphthalenyl-methanone; JWH 116
15(R)-15-methyl Prostaglandin E2 (10 mg)9-oxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-15-methyl-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; Arbaprostil|15(R)-15-methyl PGE2; 15(R)-15-methyl Prostaglandin E2
Prostaglandin F2α methyl ester (5 mg)9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid, methyl ester; PGF2α methyl ester; Prostaglandin F2α methyl ester
2,3-dinor-11β-Prostaglandin F2α (25 ug)9α,11β,15S-trihydroxy-2,3-dinor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 2,3-dinor-11β-PGF2α|2,3-dinor-11-epi PGF2α; 2,3-dinor-11β-Prostaglandin F2α
小鼠雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法15(S)-Latanoprost (1 mg)9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prost-5Z-en-1-oic acid, isopropyl ester; 15-epi Latanoprost; 15(S)-Latanoprost
CAY10572 (50 mg)1,5,6,7-tetrahydro-2-(4-pyridinyl)-4H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one; PHA 767491; CAY10572