BHK-21 [C-13]倉鼠腎成纖維細胞培養(yǎng)傳代 我公司——依托復旦大學,集研發(fā)、銷售、實驗室技術(shù)服務(wù)于一體的高科技企業(yè)。 專業(yè)經(jīng)營進口胎牛血清、細胞因子、ELISA試劑盒、細胞、抗體、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗、其產(chǎn)品吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高,代做ELISA實驗等。產(chǎn)品涉及分子生物學、細胞生物學、細菌學、遺傳學、免疫學、生物化學、蛋白質(zhì)學、細胞治療、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域。全國范圍內(nèi)免
BHK-21 [C-13]倉鼠腎成纖維細胞培養(yǎng)傳代就像養(yǎng)孩子,甚至比養(yǎng)孩子還難。培養(yǎng)液的問題比較大。因 此配制培養(yǎng)液后一定要做無菌試驗,過濾時要注意濾膜本身及其安裝是否有問題;其次,要排除培 養(yǎng)液保存問題,比如,瓶蓋有裂隙或者是蓋子與瓶口不合,密閉性差,容易細菌污染。還有就是操 作過程中出了問題,不注意無菌操作,消毒不嚴格,造成培養(yǎng)液的污染。超凈工作臺、手的消毒, 拿培養(yǎng)瓶時不要拿蓋子及其周圍,培養(yǎng)液開蓋后要斜著放,瓶蓋橫放,蓋口不要向上或向下,培養(yǎng) 瓶等盡量放在工作臺的中間等等??傊?,關(guān)鍵是無菌及無菌操作,做到這兩點應(yīng)該不會出什么差錯 了。
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關(guān)鍵詞:BHK-21 [C-13]倉鼠腎成纖維細胞培養(yǎng)傳代
簡介:全國統(tǒng)一價格,全國各地均可發(fā)貨,遠到香港、澳門、福建、新疆、內(nèi)蒙古等地:
產(chǎn)品名稱:BHK-21 [C-13]倉鼠腎成纖維細胞培養(yǎng)傳代
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
細胞規(guī)格:株
質(zhì)控標準:無支原體、無污染、符合標準
運輸方式:新鮮運輸和凍存管運輸
貨期:新鮮運輸需要1-2周,凍存管運輸?shù)男枰?-3天
我公司致力于生物醫(yī)藥領(lǐng)域的技術(shù)研發(fā)與生物試劑的銷售,力求為中國廣大生物科技研究者提供zui快捷的貼心服務(wù)。公司集研發(fā)、銷售、實驗室技術(shù)服務(wù)于一體,并以多家歐美研究平臺先進的技術(shù)實力為依托,向中國市場提供品質(zhì)國內(nèi)價格的*服務(wù),專業(yè)提供實驗所需的各類細胞株,因子,抗體等多種生物試劑。公司細胞主要來源ATCC,ECACC,ScienCell,ACC, Invitrogen 等,以及少數(shù)國內(nèi)外大學建系。同時提供各種技術(shù)服務(wù) 整體課題 論文(SCI)服務(wù)等。輕小利,重品質(zhì)。避浮夸,求務(wù)實。您的滿意,將是我們不懈的追求。竭誠歡迎廣大生物科技研究老師,前來咨詢合作
細胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結(jié)
1、細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。
仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理
2、霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移,采用過氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把過氧乙酸放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或放線菌素D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞。,將環(huán)境*消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
3、支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,原體感染,國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢死亡。用泰樂菌素,獸用支原體病的藥,但可用于細胞培養(yǎng),無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。
4、黑蛟蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話,可以增加細胞的種板密度,以提高細胞的生存率。
5、真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了。
6、原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長,zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(硫酸鏈霉素和氨芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結(jié)果。
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