豬流感(H1N1)抗體ELISA試劑盒
1. 血清標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,全血標(biāo)本室溫放置1-2 h或4℃隔夜,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
2. 血漿標(biāo)本收集、處理、保存方法:
根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素na或枸緣酸鈉作為抗凝劑,用含抗凝劑的采血guan或離心管采集血液標(biāo)本,室溫混合20 min左右,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清即為血漿。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
3. 尿液標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用干凈容器收集尿液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
4. 唾液標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用干凈離心管收集唾液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
5. 細(xì)胞標(biāo)本收集、處理、保存方法:
(1)細(xì)胞培養(yǎng)上清
取細(xì)胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
豬流感(H1N1)抗體ELISA試劑盒
(2)細(xì)胞裂解液
收集細(xì)胞培養(yǎng)液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,棄去上清,用預(yù)冷的PBS(0.01M,PH 7.4)洗滌三次。加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞。通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min,除去細(xì)胞碎片,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
6. 植物標(biāo)本收集、處理、保存方法:
取適量大小組織塊(一般0.2-0.5 g),用預(yù)冷的PBS緩沖液(0.01M,PH 7.4)漂洗三次,濾紙拭干水分。準(zhǔn)確稱重,放入勻漿管中,加入4倍體積的勻漿介質(zhì)(0.05 mol/L Tris-HCl,pH 7.4 PBS緩沖液)于勻漿管中,冰水浴條件下,剪碎組織塊,手工勻漿或機(jī)器勻漿,制成勻漿液。4℃、10000 rpm/min離心20 min,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
7. 糞便標(biāo)本收集、處理、保存方法:
采集時(shí)用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中,向離心管中加入適量PBS緩沖液(0.01M,PH 7.4),攪拌均勻。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
玻璃珠法:預(yù)先將適量的玻璃珠(根據(jù)采血量多少而定)清洗后,裝入采血容器中,滅菌后備用。采血過程中,邊采邊搖采血瓶,以使小玻璃珠在血液中滾動,以機(jī)械地除去纖維蛋白,使血液不能凝固。本法雖較麻煩,但對淋巴細(xì)胞的活性影響zui小,且可減少血小板的混雜。
(4)阿氏液采血:以阿氏液和采血量以1︰1比例采集血液,邊采邊輕輕搖動采血瓶,使之混勻。用阿氏液采血,除了抗凝外,多用于紅細(xì)胞的保存。一般在4℃條件下,阿氏液中保存的紅細(xì)胞2周其活性和特性不變。【豬口蹄抗體(區(qū)分野毒與疫苗毒)ELISA試劑盒】
玻璃珠法:預(yù)先將適量的玻璃珠(根據(jù)采血量多少而定)清洗后,裝入采血容器中,滅菌后備用。采血過程中,邊采邊搖采血瓶,以使小玻璃珠在血液中滾動,以機(jī)械地除去纖維蛋白,使血液不能凝固。本法雖較麻煩,但對淋巴細(xì)胞的活性影響zui小,且可減少血小板的混雜。
(4)阿氏液采血:以阿氏液和采血量以1︰1比例采集血液,邊采邊輕輕搖動采血瓶,使之混勻。用阿氏液采血,除了抗凝外,多用于紅細(xì)胞的保存。一般在4℃條件下,阿氏液中保存的紅細(xì)胞2周其活性和特性不變。
玻璃珠法:預(yù)先將適量的玻璃珠(根據(jù)采血量多少而定)清洗后,裝入采血容器中,滅菌后備用。采血過程中,邊采邊搖采血瓶,以使小玻璃珠在血液中滾動,以機(jī)械地除去纖維蛋白,使血液不能凝固。本法雖較麻煩,但對淋巴細(xì)胞的活性影響zui小,且可減少血小板的混雜。
(4)阿氏液采血:以阿氏液和采血量以1︰1比例采集血液,邊采邊輕輕搖動采血瓶,使之混勻。用阿氏液采血,除了抗凝外,多用于紅細(xì)胞的保存。一般在4℃條件下,阿氏液中保存的紅細(xì)胞2周其活性和特性不變。【豬口蹄抗體(區(qū)分野毒與疫苗毒)ELISA試劑盒】
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