豬口蹄抗體ELISA試劑盒
1. 血清標本收集、處理、保存方法:
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標本,全血標本室溫放置1-2 h或4℃隔夜,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。
2. 血漿標本收集、處理、保存方法:
根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素na或枸緣酸鈉作為抗凝劑,用含抗凝劑的采血guan或離心管采集血液標本,室溫混合20 min左右,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清即為血漿。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。
3. 尿液標本收集、處理、保存方法:
用干凈容器收集尿液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。
4. 唾液標本收集、處理、保存方法:
用干凈離心管收集唾液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。
5. 細胞標本收集、處理、保存方法:
(1)細胞培養(yǎng)上清
取細胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。
(2)細胞裂解液
收集細胞培養(yǎng)液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,棄去上清,用預(yù)冷的PBS(0.01M,PH 7.4)洗滌三次。加入適量的預(yù)冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通過反復(fù)凍融,使細胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min,除去細胞碎片,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。
6. 植物標本收集、處理、保存方法:
取適量大小組織塊(一般0.2-0.5 g),用預(yù)冷的PBS緩沖液(0.01M,PH 7.4)漂洗三次,濾紙拭干水分。準確稱重,放入勻漿管中,加入4倍體積的勻漿介質(zhì)(0.05 mol/L Tris-HCl,pH 7.4 PBS緩沖液)于勻漿管中,冰水浴條件下,剪碎組織塊,手工勻漿或機器勻漿,制成勻漿液。4℃、10000 rpm/min離心20 min,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。
7. 糞便標本收集、處理、保存方法:
采集時用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中,向離心管中加入適量PBS緩沖液(0.01M,PH 7.4),攪拌均勻。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。
豬口蹄抗體ELISA試劑盒
1.ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
1. 靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力;2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。2. 特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。其越高說明特異性越好。
3. 精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍
4. 穩(wěn)定性:試劑在規(guī)定條件下能儲存的時間,一般采用破壞性試驗即將試劑存放于37℃保存,定期測定其靈敏度,特異性和精密度等指標,直到其質(zhì)量指標開始下降為止,通常認為37℃每穩(wěn)定一天相當(dāng)于4-10℃保存一個半月。
5. 簡便性:指在不影響試劑的前三項指標的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性試驗中結(jié)果判斷簡單明了,定量試驗結(jié)果計算也應(yīng)簡單。
6. 安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
7. 經(jīng)濟性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進步降低成本而市場價格比較合理。
試劑評價:需要有的確證方法確證的樣品進行檢測,一般實驗室不易取得此類樣品,每新購進一次試劑評價也很麻煩??梢酝ㄟ^間接的回收實驗對試劑進行選擇
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豬流感(H1N1)抗體ELISA試劑盒 96T 定量/定性 溫馨提示:本產(chǎn)品僅供研究,不用于診斷或治療; |