廣州誠(chéng)技商貿(mào)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: DNA合成儀,寡核苷酸脫保護(hù)基微波高壓反應(yīng)器,生物標(biāo)記物成像系統(tǒng),蛋白質(zhì)成像系統(tǒng),腫瘤標(biāo)記物成像系統(tǒng),瓶厚度測(cè)量?jī)x,瓶胚尺寸測(cè)量?jī)x,瓶尺寸和厚度測(cè)量?jī)x |
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主營(yíng)產(chǎn)品: DNA合成儀,寡核苷酸脫保護(hù)基微波高壓反應(yīng)器,生物標(biāo)記物成像系統(tǒng),蛋白質(zhì)成像系統(tǒng),腫瘤標(biāo)記物成像系統(tǒng),瓶厚度測(cè)量?jī)x,瓶胚尺寸測(cè)量?jī)x,瓶尺寸和厚度測(cè)量?jī)x |
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2019-6-4 閱讀(720)
丹麥TAG COPENHAGEN A/S是的核酸合成儀的供應(yīng)商之一,公司致力于為為客戶提供多類型、高穩(wěn)定、易操作、低消耗的OligoMaker系列DNA/RNA合成儀。
OligoMaker系列產(chǎn)品范圍包括實(shí)驗(yàn)室型、中試型和工業(yè)型等多種。產(chǎn)品包括OligoMaker 12、OligoMaker 24、OligoMaker 48、OligoMaker 96、OligoMaker 192等。OligoMaker系列DNA/RNA合成儀產(chǎn)物用途及其廣泛,可用于普通引物合成、全基因合成、PCR、siRNA、特殊探針標(biāo)記、生物芯片、測(cè)序及免疫等領(lǐng)域。
Oligo高通量DNA合成儀用于合成結(jié)構(gòu)上類似DNA或RNA的寡核苷酸的自動(dòng)化儀器。一般應(yīng)用于固相合成法,每次將一個(gè)核苷酸加到所接長(zhǎng)的寡核苷酸鏈上,加入每一個(gè)核苷酸都利用相同的化學(xué)反應(yīng)與相應(yīng)的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。
Oligo高通量DNA合成儀特點(diǎn):
? 包括一個(gè)靈活的合成協(xié)議編輯器,它允許操作員修改所包含的協(xié)議,并將它們保存在一個(gè)新名稱下,或者從頭開始編寫協(xié)議。協(xié)議編輯可以在Excel中完成。對(duì)于不同的合成規(guī)模和序列長(zhǎng)度,很容易編輯特殊協(xié)議。比如,可以給耦合緩慢的堿基對(duì)一個(gè)特別的延長(zhǎng)的耦合時(shí)間。如果必要的話,可以給所有單體額外的耦合反應(yīng)時(shí)間。
? 軟件簡(jiǎn)單易用。在計(jì)算機(jī)或平板的Excel表中創(chuàng)建運(yùn)行數(shù)據(jù)后,可使用Wi-Fi等網(wǎng)絡(luò)連接或標(biāo)準(zhǔn)U盤傳輸?shù)絻x器上。實(shí)驗(yàn)運(yùn)行中,可以從PC端收集實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
? 性能
OligoMaker X12可以在1小時(shí)內(nèi)平行合成12條20對(duì)的寡核苷酸。
OligoMaker 48可以在2小時(shí)內(nèi)平行合成多達(dá)48條20對(duì)的寡核苷酸。
OligoMaker 96可以在3小時(shí)內(nèi)平行合成多達(dá)96條20對(duì)的寡核苷酸。
OligoMaker 192可以在4小時(shí)內(nèi)平行合成多達(dá)192條20對(duì)的寡核苷酸。
? 可在IUPAC-IUB標(biāo)準(zhǔn)規(guī)則下合成10、50、200和1000nmol規(guī)模的核苷酸。
兩個(gè)反應(yīng)盤,一個(gè)盤可以加載和合成核苷酸,另一個(gè)盤準(zhǔn)備進(jìn)行凈化步驟。
OligoMaker 48可以升級(jí)為OligoMaker 96和OligoMaker 192;
OligoMaker 96可以升級(jí)為OligoMaker 192。
DNA的固相合成。即DNA3'端固定于基質(zhì)上,然后沿3'向5'方向依此添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于應(yīng)用DNA聚合酶的DNA合成。
合成過(guò)程
個(gè)堿基的3‘末端固定在樹脂上,下一個(gè)堿基的5’-OH用二對(duì)甲氧三苯甲基DMT保護(hù),堿基上的氨基用苯甲酸保護(hù),然后對(duì)3‘-OH用氨基磷酸化合物進(jìn)行活化。
1。1個(gè)堿基的5’-OH和下個(gè)堿基的3‘-OH形成亞磷酸三酯,
2。然后用碘氧化成磷酸三酯
3。加入C2H6CL2除去第二個(gè)堿基5’-OH上的保護(hù)劑DMT
循環(huán)進(jìn)行加入下一個(gè)堿基
合成完畢后
亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類儀器的一般操作步驟。亞磷酰胺DNA合成的試劑有:保護(hù)堿基的5/—DMT,A、G、C、T亞磷酰胺單體,四唑偶聯(lián)催化劑,乙酐,N—甲基咪唑封閉試劑,TCA脫保護(hù)溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶劑,氨水切除溶液。使用步驟如下:
1、仔細(xì)檢查合成儀上所有試劑瓶中的試劑量,必要時(shí)換掉試劑瓶,特別注意乙腈的量,因?yàn)樵撊軇┯昧枯^大。
2、將標(biāo)記好的清潔的收集瓶裝在合成儀上。
3、將要合成的DNA序列輸入合成儀。
4、檢查選擇的合成步驟是否正確。
5、選擇結(jié)束方法:TritylOffAuto是儀器的原始狀態(tài),若打算以5,—DMT基團(tuán)連接純化寡核苷酸,將其轉(zhuǎn)變?yōu)門ritylOnAuto結(jié)束狀態(tài)。
6、選擇結(jié)束方法,一般為系統(tǒng)的原始狀態(tài)。
7、在每個(gè)柱監(jiān)視器的Username下,輸入你所希望的保存名字。
8、以代碼代替相應(yīng)的DNA序列標(biāo)記每一個(gè)收集瓶。
9、打印出每一個(gè)柱設(shè)置的詳細(xì)資料。
10、檢查打印出來(lái)的資料是否正確。
11、運(yùn)行StartColumn步驟檢查每一個(gè)柱的位置,確保合成儀上合成柱處于正確的位置。
12、檢查連接在合成儀上的溶劑殘留(廢液瓶)是否充滿。
13、如果分部收集器用來(lái)收集每個(gè)DMT脫保護(hù)步驟的流出物,確保試管充分清潔干凈,并打開分部收集器,確保DMT廢液管路通向分部收集器。
14、啟動(dòng)循環(huán),運(yùn)行開始程序清洗試劑管路,除去原來(lái)的試劑。