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產(chǎn)品名稱: | 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)elisa試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) | ||||||
英文名稱: | Rat MMP-12 (Matrix Metalloproteinase 12) elisa Kit | ||||||
規(guī)格: | 48T/96T | ||||||
保存: | 2-8度保存 | ||||||
用途: | 科研使用,請勿用于診斷 | ||||||
1、要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20℃左右時,1ml的水可以看作是1g,200ul的水可以看作是0.2g),每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定。 2、在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 3、吸取液體時速度不且太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準(zhǔn)確。 4、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭的液體和孔壁接觸,液體會自然流下去。吸入液體時的方法是吸兩檔打一檔,防止由于槍頭的毛細(xì)作使得部分液體不能流出而造成誤差。 5、吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。 6、液體全部加入酶標(biāo)孔后,將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應(yīng)。 7、孵育時要使蓋板膜封好酶標(biāo)板,防止水分蒸發(fā),以防曲線不成線形。 8、實(shí)驗(yàn)前半個小時將試劑從冰箱中取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同。(酶標(biāo)板只要取出需要量) 9、手工洗板時每次加入洗滌液后,應(yīng)靜置15-30s,不要將一個酶標(biāo)孔中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。 10、檢測吸光值前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開,將其預(yù)熱30min以上。 11、底物為TMB,避免與皮膚相接觸。終止液為2mol的濃硫酸,具有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸皮膚。 12、孵育時間應(yīng)嚴(yán)格按照試劑盒說明書上的時間為準(zhǔn)。 13、不同廠家生物試劑的試劑盒因生物試劑工藝和操作方法略有不同,所以務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性。且同一廠家不同批次的產(chǎn)品也不能交叉使用。 | |||||||
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)elisa試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) | |||||||
問題:實(shí)驗(yàn)操作中顯示和比色的注意事項? 答:TMB 經(jīng) HRP 作用后,約 40 分鐘顯色達(dá),隨即逐漸減弱,至 2 小時后即可*消退至 無色。TMB 的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。 這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長時間(12-24 小時)不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外, 各類酸性終止液則會使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。 | |||||||
問題:溫育的注意事項? 答:由于試劑盒通常設(shè)定的反應(yīng)溫度為 37 度,在這個溫度下放置 30 分鐘,蒸發(fā)的水分 會很多,對于整個反應(yīng)體系來講,各種反應(yīng)物的濃度會不斷增加,這樣必會導(dǎo)致反應(yīng)zui后的 值升高。因此溫育時應(yīng)蓋上膠貼。 | |||||||
問題:洗滌在ELISA操作中的重要性? 答:洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應(yīng)步驟,但卻決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELSIA 就是靠洗滌來 達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù),應(yīng)引起操作者的高度重視,按要求洗滌,不得馬虎。 | |||||||
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)elisa試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) | |||||||
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