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阿利新藍染色實驗代測介紹:
在涉及關節(jié)軟骨及軟骨下骨的形態(tài)學研究中,常需聯(lián)合使用多種染料以顯示其組織學結構。其中,起源于上世紀60年代的番紅O(safranin O)-固綠(fast green)染色因可以直觀反映關節(jié)軟骨、軟骨下骨和骨組織的結構而備受青睞。
番紅固綠染色實驗步驟
1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ10min-無水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。
2、番紅染色:切片入1%番紅染液染色1-2h。自來水稍洗,洗去多余染料。
3、脫色:入50%,70%,80%梯度酒精脫色各5-10s。
4、固綠染色:切片入0.5%固綠染液中染色5-10s。無水乙醇I中脫色30s,無水乙醇II中脫色1min。
5、封片:切片于60℃烤箱烤干后于二甲苯透明5min,中性樹膠封片。
6、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。
阿利新藍染色實驗代測注意事項:
1、片子染色不好需要重新染色時,可以用自來水浸泡去除固綠顏色,鹽酸酒精浸泡去除番紅顏色。
2、番紅鮮紅色除了軟骨外其他有些地方的紅色也較深。一旦番紅著色深后再染固綠染不上,需進將番紅紅色全部脫掉后重新染方可。
3、染色時間稍有差異紅色和綠色的差異就會很大,要注意鏡下控制兩種顏色的程度。
4、番紅染次數(shù)多了會產生沉淀且不易著色,需及時更換染液。
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