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當(dāng)前位置:南京信帆生物技術(shù)有限公司>>生物試劑>> 3xFLAG peptide
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌GEMIG
廠商性質(zhì)其他
所 在 地南京市
更新時間:2024-12-13 15:13:55瀏覽次數(shù):456次
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南京信帆生物對質(zhì)量的控制涵蓋生物試劑、放行、市場質(zhì)量反饋的全過程,包括原輔料、包裝材料、工藝用水、中間過程及成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和分析方法的建立、取樣、檢驗(yàn)和產(chǎn)品穩(wěn)定性考察和市場不良反饋樣品的復(fù)核等工作,確保產(chǎn)品品質(zhì)。信帆生物致力于追求企業(yè)的發(fā)展,以創(chuàng)新為根本,不斷優(yōu)化運(yùn)作,為每一位科研用戶提供更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和更熱情的服務(wù)。
10MG/只 [¥920.00]
3xFLAG peptide
簡介:3X FLAG Peptide是一個合成的含有三個重復(fù)DYKXXD氨基酸序列的多肽。
氨基酸序列:MDYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK(簡稱)
N-Met-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Gly-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Ile-Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-C(全稱)
分子式:C120H169N31O49S 分子量:2861.87
技術(shù)指標(biāo)
外觀:凍干粉
純度:>95% by LC-MS
溶解性:water 2mg/ML; TBS (5mg/ml);
儲存條件:-20℃
運(yùn)輸條件:常溫運(yùn)輸
用途:蛋白洗脫;科研試劑。
使用方法推薦(來自公開文獻(xiàn)僅供參考)
一:常見儲存液或者工作液配置方法
儲存液配置:3xFLAG peptide溶于1X的TBS(pH7.4),濃度為5mg/ml; 分裝儲存于-20℃,避免反復(fù)凍融。
工作液配置:3xFLAG -peptide常用工作液濃度為100ug/ml,可用于從Anti-FLAG M2親和凝膠上洗脫3xFLAG融合蛋白。5倍柱體積的工作溶液即可充分洗脫大部分3xFLAG融合蛋白
二:F
哺乳動物細(xì)胞FLAG標(biāo)簽蛋白純化方案
一般注釋以下方案基于并優(yōu)化了哺乳動物細(xì)胞(U2OS)中FLAG標(biāo)記蛋白的過表達(dá),該細(xì)胞生長在一個10平方厘米的平板上,以90%的融合率轉(zhuǎn)染,并在48小時后收獲。該方案適用于相互作用蛋白的共純化(基于FLAG-Ring1B/Bmi1)。
1重新懸浮和Sonicate細(xì)胞將冷凍的哺乳動物細(xì)胞沉淀重新懸浮在2 mL FLAG純化懸浮緩沖液(1XPBS、1mM DTT、1X蛋白酶抑制劑)中。為了保持酶活性,這種再懸浮緩沖液不含任何裂解劑。除了超聲波處理(1%Triton X或其他)外,非用于活性采集的純化物還可以使用實(shí)際的裂解緩沖液。該方案僅使用超聲波處理。
將混合物轉(zhuǎn)移到干凈的2 mL微管中,用Misonix XL-2000聲波儀上的“振幅設(shè)置1[共20個]"超聲處理2次,每次持續(xù)10秒,中間暫停1分鐘。
2制備細(xì)胞裂解物并用磁珠孵育。在4℃下以12000 g離心細(xì)胞裂解物20分鐘,使裂解物碎片沉淀。
使用2mL“微量"純化柱,用2mL FLAG純化懸浮緩沖液沖洗柱。
將100µL M2 FLAG親和珠轉(zhuǎn)移到柱中,用2 mL FLAG純化懸浮緩沖液洗掉凝膠。
干燥柱鼻(底部),并用蓋子緊緊蓋上,然后轉(zhuǎn)移離心機(jī)中的上清液
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