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        1. 南京信帆生物技術(shù)有限公司
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          大鼠V-Ha-Ras Harvey肉瘤病毒癌基因同源物(HRAS)elisa試劑盒

          參  考  價面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

          產(chǎn)品型號

          品       牌

          廠商性質(zhì)其他

          所  在  地南京市

          更新時間:2016-12-28 00:23:26瀏覽次數(shù):301次

          聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
          南京信帆生物供應(yīng)大鼠V-Ha-Ras Harvey肉瘤病毒癌基因同源物(HRAS)elisa試劑盒,提供技術(shù)指導(dǎo)和售后服務(wù),質(zhì)量穩(wěn)定,提供免費代測服務(wù)。信帆生物銷售的試劑盒均采用進(jìn)口材料生物試劑,具有操作簡單,靈敏度高等特點,咨詢.所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于食用,醫(yī)療等其它用途。
          產(chǎn)品名稱:大鼠V-Ha-Ras Harvey肉瘤病毒癌基因同源物(HRAS)elisa試劑盒
          英文名稱:Rat HRAS (V-Ha-Ras Harvey Rat Sarcoma Viral Oncogene Homolog) elisa Kit 
          規(guī)格:48T/96T
          產(chǎn)品保質(zhì)期:6個月
          保存條件:2-8度
          該試劑盒操作原理:
          本試劑盒含量是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將待測物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系
          我們在做ELISA實驗的時候,通常選取血液樣本為我們的代測樣本,具體收集方法如下:
          血液樣本的收集:
          全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
          1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
          2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
          大鼠V-Ha-Ras Harvey肉瘤病毒癌基因同源物(HRAS)elisa試劑盒
          我們在選擇抗凝劑的時候,有幾點需要注意的:
          ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要*,同時所取的全血的量也要盡量*;
          ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
          ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
          ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
          用于測定。
          組織樣本也是我們經(jīng)常使用到的,動物組織樣本的前處理,勻漿方法如下:
          動物組織樣本的前處理:
          1、取組織塊(0.1g~0.2g)在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放入勻漿管中。
          2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(使用0.86%的生理鹽水)于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。
          3、勻漿的方式有多種:手工勻漿,機器勻漿,超聲粉碎。
          ①、手工勻漿:將玻璃勻漿管置于冰水浴條件下,手動勻漿,30秒/次,間隔30秒,重復(fù)6~8次,制成10%的勻漿液。
          ②、機器勻漿:用機械式勻漿機(組織搗碎機或內(nèi)切式勻漿機),8000~10000轉(zhuǎn)/分,冰水浴條件下,10秒/次,間隙30秒,連續(xù)3~5次。(皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時間)
          ③、超聲粉碎:用超聲粉碎機進(jìn)行粉碎,可用Soniprep150型超聲波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒使細(xì)胞破碎,也可用國產(chǎn)超聲波發(fā)生儀,用400安培,5秒/次,間隙10秒反復(fù)3~5次。
          鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片,顯微鏡下觀察細(xì)胞是否破碎,若沒有則可延長勻漿時間。
          4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機2500轉(zhuǎn)/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進(jìn)行測定.(測定相應(yīng)指標(biāo)的同時需測一下相應(yīng)樣本的蛋白濃度,總蛋白測試盒本所有售)
          大鼠V-Ha-Ras Harvey肉瘤病毒癌基因同源物(HRAS)elisa試劑盒
          我們銷售的試劑盒的具體操作簡單的特點,具體步驟如下(試劑盒已經(jīng)包含了所有試劑,自備儀器為酶標(biāo)儀,洗板機,溫育箱,移液器):
          1. 加樣:標(biāo)準(zhǔn)品設(shè)定5個濃度點10個孔,每個濃度設(shè)定平行孔,加入50微升不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,空白孔設(shè)定1個孔加入50微升蒸餾水(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔,在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
          2. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
          3. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
          4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
          5. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
          6. 溫育:操作同3。
          7. 洗滌:操作同5。
          8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
          9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
          10. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
          大鼠V-Ha-Ras Harvey肉瘤病毒癌基因同源物(HRAS)elisa試劑盒
          我們銷售的試劑盒性能穩(wěn)定:
          試劑盒性能我們是通過幾個數(shù)值反應(yīng)的:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批間分別小于9%和11%
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          所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于食用,醫(yī)療等其它用途。

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