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大鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒簡介
己糖激酶(hexokinase,HK)是轉(zhuǎn)移酶,專一性不強,受葡萄糖-6-磷酸和ADP的抑制,KM小,親和性強,可以針對多種六碳糖進行作用。
中文名 己糖激酶 外文名 hexokinase 反應(yīng)過程 己糖 ATP→己糖-6-磷酸 ADP 化學(xué)成分 激酶kinase
大鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒技術(shù)簡介
溫育
ELISA反應(yīng)是抗原、抗體的結(jié)合在固相表面上發(fā)生的一系列的反應(yīng),抗原抗體結(jié)合是一個逐步平衡的過程,需要經(jīng)過擴散才能達到反應(yīng)的終點,因此ELISA反應(yīng)需要一定時間的溫育。溫育也是影響檢測結(jié)果的關(guān)鍵因素,尤其是對弱陽性標本影響zui為明顯[2]。溫育方式常采用溫箱法、微波輻射法和水浴法。其中水浴法能較好地解決因受熱不均衡所致的周圍孔與中央孔結(jié)果的吸光度差異(即“邊緣效應(yīng)”)。溫育常采用的溫度是43℃、37℃、室溫和4℃,其中zui常用的是37℃,也是大多數(shù)抗原抗體反應(yīng)的適合溫度。為了保證各板的溫度能迅速平衡,可將反應(yīng)板放在水浴箱中,漂浮在水面上,但反應(yīng)板不應(yīng)疊放。為避免標本或稀釋液蒸發(fā)而吸附于孔壁,反應(yīng)板應(yīng)加蓋或貼封紙。注意溫育的溫度和時間,應(yīng)按規(guī)定力求準確無誤。因為孵育時間過長,可以出現(xiàn)非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*,導(dǎo)致花板。
洗滌
洗滌是ELISA不同于均相免疫學(xué)檢測技術(shù)的一大特征,洗滌在整個ELISA反應(yīng)過程雖不是一個反應(yīng)步驟卻非常關(guān)鍵。操作者應(yīng)嚴格按照要求洗滌,因為ELISA試驗就是依靠洗滌來達到分離游離的酶標記物和結(jié)合的酶標記物的目的。通過洗滌,可以清除殘留在板孔中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。采用自動洗板機洗板,洗板機設(shè)置時間、間隔、次數(shù)要保持一致,不能過多或過少。洗板次數(shù)較少,造成殘留,引起假陽性結(jié)果。洗板次數(shù)過多,可造成抗原抗體結(jié)合物洗脫,造成假陰性結(jié)果[3]。要保證洗液注滿各孔,防止在反應(yīng)孔中形成氣泡而造成洗滌不充分。洗板結(jié)束后,在干凈無塵的吸水紙上輕輕拍干。如洗液量不足可致洗板不*,洗板針堵塞,抽吸不*,洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
我司elisa試劑盒的優(yōu)點:操作簡單、快速、靈敏度高、特異性強、性價比高、樣品所需量少
1.操作簡單、快速。所有操作步驟,都有圖譜示意,讓你簡單明了,不必為研究操作步驟而耽擱時間。
2.靈敏度高。 酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng) ,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。我們的試劑盒實現(xiàn)了在ug、ng、pg水平上對其進行定量。
3.特異性強。特異性來自抗體或抗原的選擇性。采用的*抗體抗原,保證的試劑盒品質(zhì)。
4.性價比高,質(zhì)量穩(wěn)定。
5.樣品所需量少。
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