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大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)elisa試劑盒基本信息簡介
血管內(nèi)皮生長因子(英文:vascular endothelial growth factor,簡稱:VEGF),早期亦稱作血管通透因子(英文:vascular permeability factor,簡稱:VPF),是血管內(nèi)皮細胞特異性的肝素結(jié)合生長因子(heparin-binding growth factor),可在體內(nèi)誘導(dǎo)血管新生(induce angiogenesis in vivo)。中文名 血管內(nèi)皮生長因子 外文名 vascular endothelial growth factor 簡 稱 VEGF 作 用 在體內(nèi)誘導(dǎo)血管新生。
大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)elisa試劑盒使用方法簡介
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
我司elisa試劑盒的優(yōu)點:操作簡單、快速、靈敏度高、特異性強、性價比高、樣品所需量少
1.操作簡單、快速。所有操作步驟,都有圖譜示意,讓你簡單明了,不必為研究操作步驟而耽擱時間。
2.靈敏度高。 酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng) ,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。我們的試劑盒實現(xiàn)了在ug、ng、pg水平上對其進行定量。
3.特異性強。特異性來自抗體或抗原的選擇性。采用的*抗體抗原,保證的試劑盒品質(zhì)。
4.性價比高,質(zhì)量穩(wěn)定。
5.樣品所需量少。
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