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        1. 南京信帆生物技術有限公司
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          信帆生物答疑:明膠酶譜試劑盒在操作時候的注意事項

          時間:2018/2/25閱讀:988
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          信帆生物告知您:明膠酶譜試劑盒在操作時候的注意事項!

          本公司銷售基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2/MMP9明膠酶譜試劑盒,很多老師在使用的時候出不來條帶,信帆生物為您答疑解惑:

          做不出來的原因:

          1.樣本失活

          2.電泳操作不對

          3.孵育時間不夠

          信帆生物告知您:明膠酶譜試劑盒在操作時候的注意事項!

          注意事項:

          1.制備聚丙烯酰胺時應注意排除氣泡。

          2.明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和PH值等因素的影響,因此緩沖液配制應嚴格準確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。

          3.用大梳子

          4.孵育液的PH在7.5-7.6,復性的TRITON時間長了會有絮狀物,所以實驗時盡量使用新鮮配置的。

          5.孵育的37度不要在CO2培養(yǎng)箱中,因為會改變孵育液的PH值,在普通孵箱即可。

          6.細胞樣本用PBS 5倍體積震蕩裂解,估算細胞的體積,然后加入5倍體積的PBS,渦旋振蕩15-30s,而后靜置或低速離心.或者手動震蕩。

          7.組織或者細胞的話可以用PBS,也可以用低滲溶液如三分之一或者四分之一的生理鹽水按照5倍體積加入后震蕩裂解細胞,離心即可,步驟和提蛋白很相似即可,其實重點的步驟主要是采用低滲裂解液進行裂解,組織的話可以勻漿20-30次,然后10000轉(zhuǎn)左右離心,5分鐘取上清即可。

          信帆生物告知您:明膠酶譜試劑盒在操作時候的注意事項!

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