在日常分離分析工作中,
C18色譜柱維護是否得當,直接影響色譜柱的壽命。下面介紹
C18色譜柱在日常使用過程中應(yīng)注意的事項。
(1)柱子在裝卸、更換時,動作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動,以免柱床產(chǎn)生空隙。
(2)如使用柱溫控制裝置時,應(yīng)注意在通入流動相后才能升溫。
(3)如果儀器用來做常規(guī)分析,樣品種類有限,但分析次數(shù)多,則不妨為每一類常規(guī)分析配置1根柱,這樣有助于延長柱子的壽命。
(4)流動相使用前需進行脫氣處理,以免降低柱效和影響檢測等。樣品溶液需經(jīng)適當?shù)那疤幚砑斑^濾,以減少柱污染和堵塞。
(5)在更換流動相種類時,應(yīng)注意溶劑的互溶性,防止發(fā)生鹽析現(xiàn)象。
(6)C18色譜柱屬非極性鍵合相色譜柱,流動相的pH值應(yīng)嚴格控制在2~7之間,以免損壞柱子。
(7)柱子的實際操作壓力應(yīng)低于填裝時的高壓力,一般在高壓力一半以下。一般不超過20 593.965~29 419.95 kPa。在低壓力(≤14 709.975 kPa)的范圍使用,可使柱保持長時期的高柱效。
(8)在完成分離分析工作之后,不應(yīng)立即停機,需及時對色譜分析系統(tǒng)進行沖洗,一般0.5 h以上,以除去色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。
(9)C18一般用Methanol作為保存溶劑,以防柱子干裂而損壞。嚴禁水或緩沖溶液長時間在色譜流路中保留。
(10)如果流動相中有鹽類,首先用水充分清洗。如果是胺類添加到流動相中,要用50%Methanol和0.05%磷酸溶液混合溶劑沖洗,不要只用水沖洗。
(11)選用合適的C18保護柱,以保護分析柱免受雜質(zhì)顆粒及不可逆吸附的干擾物的影響。保護柱內(nèi)裝填料顆粒度應(yīng)與分析柱填料的顆粒度盡量一致。
(12)柱的保存期不宜太長。短期不用的C18柱,用Methanol沖洗30~60 min,然后將柱兩端密封。較長期不用的柱子,一是采取定期沖洗,再密封的方法;二是在沖洗后,柱兩端各裝1只有一定容量的灌滿Methanol的容器(只裝一端也可),以補充在較長存放期間柱內(nèi)溶劑的蒸發(fā)。