目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>蔗糖系列>> 海藻糖6磷酸酯酶(TPP)生化檢測(cè)試劑盒
參考價(jià) | ¥300-¥5000 | /盒 |
參考價(jià):¥300 ~ ¥5000
更新時(shí)間:2023-11-07 11:09:27瀏覽次數(shù):902評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/48樣 50管/24樣 |
---|---|---|---|
貨號(hào) | EY-01S1230 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅用于科研 |
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
海藻糖6磷酸酯酶(TPP)生化檢測(cè)試劑盒 | 100管/48樣 50管/24樣 | EY-01S1230 |
測(cè)定意義:
海藻糖又稱為漏蘆糖、蕈糖,是由兩個(gè)糖分子組成的一個(gè)非還原性雙糖,能夠在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環(huán)境條件下在細(xì)胞表面形成的保護(hù)膜,有效地保護(hù)生物分子結(jié)構(gòu)不被破壞,從而維持生命體的生命過(guò)程和生物特征。
植物體內(nèi)主要以糖為底物合成海藻糖,海藻糖-6-磷酸酯酶 (trehalose 6-phosphate phosphatase,TPP)是該途徑中海藻糖合成關(guān)鍵酶之一,該反應(yīng)首先在海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)的作用下,催化尿苷二磷酸糖(UDPG)和 6-磷酸糖生成中間產(chǎn)物6-磷酸海藻糖,再在TPP的作用下去磷酸化,生成海藻糖。
測(cè)定原理:
TPP 催化海藻糖-6-磷酸產(chǎn)生海藻糖,同時(shí)釋放出磷酸根,使用鉬銻抗比色法測(cè)定。
需自備的儀器和用品:
酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑一:液體×1瓶,室溫保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現(xiàn)配現(xiàn)用。
試劑四:液體×1支,4℃保存。
1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測(cè)。
2、細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測(cè)。
3、血清等液體:直接測(cè)定。
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體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶2C8(Amodiaquine)活性 | 果蠅細(xì)胞培養(yǎng)基 | 綠膿菌素測(cè)定培養(yǎng)基(PDP) 250 用于綠膿桿菌的綠膿菌素測(cè)定試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn)) incubation media 綠膿菌素測(cè)定培養(yǎng)基(PDP) 250 用于綠膿桿菌的綠膿菌素測(cè)定試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn)) |
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(1)按照蛋白濃度計(jì)算
活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。
ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T
=1608×△÷Cpr
(2)按照樣本質(zhì)量計(jì)算
活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。
ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
活性單位定義:25℃中每104個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。
ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細(xì)胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A ÷細(xì)胞數(shù)量
(4)按液體體積計(jì)算
活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。
ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T
=1608×△A
ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應(yīng)體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,1min。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)