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奧林巴斯CX33屬于生物顯微鏡,其對于細胞以及切片的觀測較為重要,因此作為光學(xué)顯微鏡,其光學(xué)參數(shù)一定是需要完整清楚地展現(xiàn)出來的。因此,在對奧林巴斯CX33進行分析的過程中,我們一定要對奧林巴斯CX33顯微鏡關(guān)鍵參數(shù)信息進行簡單分析。
奧林巴斯CX33屬于生物顯微鏡,其對于細胞以及切片的觀測較為重要,因此作為光學(xué)顯微鏡,其光學(xué)參數(shù)一定是需要完整清楚地展現(xiàn)出來的。因此,在對奧林巴斯CX33進行分析的過程中,我們一定要對其關(guān)鍵參數(shù)信息進行簡單分析。
奧林巴斯CX33顯微鏡關(guān)鍵參數(shù):
作距離(WD):工作距離是指當(dāng)所觀察的標(biāo)本最清楚時物鏡的前端透鏡下面到標(biāo)本的蓋玻片上面的距離。物鏡的工作距離與物鏡的焦距有關(guān),物鏡的焦距越長,放大倍數(shù)越低,其工作距離越長。
在實際應(yīng)用中,奧林巴斯顯微鏡,如生物顯微鏡和金相顯微鏡,根據(jù)應(yīng)用場景不同,可選標(biāo)準(zhǔn)焦距物鏡和長工作距離物鏡。
數(shù)值孔徑(N.A):數(shù)值孔徑是透鏡和聚光鏡的主要技術(shù)參數(shù),是判斷兩者(尤其對物鏡而言)性能高低的重要標(biāo)志。其數(shù)值的大小,分別標(biāo)刻在物鏡和聚光鏡的外殼上。
數(shù)值孔徑與其它技術(shù)參數(shù)有著密切的關(guān)系,它幾乎決定和影響著其它各項技術(shù)參數(shù)。它與分辨率成正比,與放大率成正比,焦深與數(shù)值孔徑的平方成反比,NA值增大,視場寬度與工作距離都會相應(yīng)地變小。
如圖奧林顯微鏡物鏡40倍的數(shù)值孔徑為0.65.
分辨率:
顯微鏡可分辨的兩點間的最小距離,即為顯微鏡的分辨率,它主要取決于照明波長以及物鏡的球差系數(shù)。
通常人眼的分辨本領(lǐng)大概是0.2mm(即人眼可分辨的兩點間最小距離為0.2mm)
可見光的波長在3900~7600Å,光學(xué)玻璃透鏡分辨本領(lǐng)的極限值可達0.2微米;而電子束的波長約為可見光的十萬分之一。
光學(xué)顯微鏡: >200nm
掃描電子顯微鏡:~1nm
透射電子顯微鏡:~0.1nm
在奧林巴斯顯微鏡的物鏡或者機身上,通常不會標(biāo)識分辨率這個參數(shù),因為此參數(shù)是由照明及物鏡共同決定的,但是一般保證奧林巴斯顯微鏡的分辨率可大于200nm.
景深(焦深):
景深為焦點深度的簡稱,即在使用顯微鏡時,當(dāng)焦點對準(zhǔn)某一物體時,不僅位于該點平面上的各點都可以看清楚,而且在此平面的上下一定厚度內(nèi),也能看得清楚,這個清楚部分的厚度就是焦深(顯微鏡景深)。焦深大,可以看到被檢物體的全層,而焦深小,則只能看到被檢物體的一薄層。
顯微鏡的景深計算方法。顯微鏡一般都是垂直向下取景的,通過視場直徑內(nèi)觀察到的物體表面凸起的位置與凹下的位置都能夠看的很清楚時,那么凸點與凹點之間的高度差就是景深了,對于顯微鏡來說景深越大越好,景深越大在觀察高低不平整的物體表面時,能夠得到更好更立體的清晰度畫面。
視場直徑(視場數(shù)):
觀察顯微鏡時,所看到的明亮的圓形范圍叫視場,它的大小是由顯微鏡目鏡里的視場光闌決定的。視場直徑也稱視場寬度,是指在顯微鏡下看到的圓形視場內(nèi)所能容納被檢物體的實際范圍。視場直徑愈大,愈便于觀察。
視場直徑與視場數(shù)成正比。增大物鏡的倍數(shù),則視場直徑減小。因此,若在低倍鏡下可以看到被檢物體的全貌,而換成高倍物鏡,就只能看到被檢物體的很小一部份。
目前奧林巴斯顯微鏡上所采用的鏡頭,一般視場數(shù)為22mm,23mm,26.5mm,同一個顯微鏡型號用戶也可以選擇不同視場直徑的目鏡來獲得更大的視場范圍。
放大倍數(shù):
顯微鏡包括兩組重要的光學(xué)部件—物鏡和目鏡。顯微鏡的的放大倍數(shù)主要通過物鏡來保證,物鏡的放大倍數(shù)一般可達100倍,目鏡的放大倍數(shù)可達30倍。
在使用顯微鏡觀察物體時,應(yīng)根據(jù)其組織的粗細情況,選擇適當(dāng)?shù)姆糯蟊稊?shù)。以細節(jié)部分觀察得清晰為準(zhǔn),盲目追求過高的放大倍數(shù),會帶來許多缺陷。因為放大倍數(shù)與透鏡的焦距有關(guān),放大倍數(shù)越大,焦距必須越小,同時所看到物體的區(qū)域也越小。
需要注意的是有效放大倍數(shù)問題。物鏡的數(shù)值孔徑?jīng)Q定了顯微鏡有效放大倍數(shù)。。
理論上顯微鏡的最大放大倍數(shù)可以達到兩千多倍,但是目前不僅由于受分辨率的限制,并且還由于制造工藝水平的限制,*顯微鏡的最高有效放大倍數(shù),只能達到一千倍左右。因此有時說一臺顯微鏡可以放大兩千倍,這只不過是能夠“放大”而已,并不能說明它的清晰程度增大,也許只看見一個放大的模糊形象。顯微鏡的放大倍數(shù)等于目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)的乘積。
顯微鏡的放大倍數(shù)為目鏡倍數(shù)乘物鏡倍數(shù),如目鏡為10倍,物鏡為40倍,則放大倍數(shù)為40×10倍(放大400倍)。光學(xué)顯微鏡的極限放大是2000倍,可分辨相距1^10(-5)厘米的兩點。2000倍時屬于無效放大,不能增加分辨率超過分辨極限。
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