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更新時(shí)間:2024-08-24 09:42:55瀏覽次數(shù):1905評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100U |
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貨號(hào) | E8350 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 腸激酶可去除位于蛋白質(zhì)N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合標(biāo)簽 |
索萊寶重組牛腸激酶是一種高純度的重組牛腸激酶。該酶經(jīng)HPLC純化,純度高,特異性高,并且不含其他蛋白 酶。腸激酶(EC3.4.21.9)是一個(gè)特定的蛋白酶,它可以切割前面含有四個(gè)天冬氨酸的賴氨酸羧基端位點(diǎn):天 冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-賴氨酸。腸激酶可去除位于蛋白質(zhì)N-末端的融合蛋白,以除去不需要的 融合標(biāo)簽。
來(lái)源:重組大腸桿菌 理論MW:25,850Da 活性:1U定義為在25℃,12h~16h之內(nèi),將50ug保存于25mMTris-HCl8.0緩沖液中的融合蛋白切割95%所 需的酶量。
高特異性
1)特定的蛋白酶,切割前面含有四個(gè)天冬氨酸的賴氨酸羧基端位點(diǎn):天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬 氨酸-賴氨酸(DDDDK)
2)不含其他蛋白酶,無(wú)非特異性切割
圖一:SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果,純化的腸激酶一個(gè)單一的主帶
圖二:1U的EK作用于50ug底物0min,10min,20min,30min,40min,50min,60min后的SDS-PAGE分析
圖三:1U,2U,5U,10U的EK作用于50ug底物4h后和1U的EK作用于50ug底物16h后的SDS-PAGE分析
在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切效果受影響。
可參照以下推薦方法進(jìn)行酶切:
1)為獲得理想酶切結(jié)果,請(qǐng)將樣品透析到25mM Tris-HCl pH8.0緩沖液中,再進(jìn)行酶切。
2)若不便透析,可將樣品稀釋,咪唑含量在100mM以下,NaCl濃度在50mM以下,甘油濃度小于5%以 下進(jìn)行酶切,酶的用量與蛋白的比例不變(即1U酶切50µg蛋白)。
3)如果樣品溶液中含有上述成分中的一種或多種,且不便去除,此時(shí)適當(dāng)增加酶量或延長(zhǎng)酶切時(shí)間,也 可達(dá)到較好酶切效果。
具體參照索萊寶的使用說(shuō)明
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